仙人掌多糖提取、分离纯化及其清除活性氧自由基作用研究

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自古以来,仙人掌就有食用和药用的传统,具有多种保健功能和药理活性,本论文对仙人掌的主要活性物质——仙人掌多糖进行了一系列的研究,主要内容如下: 1.水提法和碱提法提取仙人掌多糖的研究 主要研究了水提法和碱提法的提取工艺,用正交法确定了这两种方法的最佳提取工艺,得出水提法最佳工艺条件为:提取温度为80℃,提取时间为1.5小时,液固比为40:1;碱提法最佳提取工艺条件为:提取时间为2小时,提取温度为80℃,液固比为60:1,碱浓度为0.3mol/L。另外比较了两种方法的多糖提取得率以及提取液的颜色,得出碱法提取虽然提取率较高,但提取液颜色更深,后续纯化工艺中还要进行脱色,而水提法的提取液颜色较浅,呈淡黄色,在纯化步骤里可以不进行脱色,可简化纯化过程。 2.仙人掌多糖的分离纯化研究 水提法得到的仙人掌粗多糖溶液,经savag法除蛋白后再通过SephacrylS-400 HR凝胶柱层析后获得多糖组分OP。通过聚丙烯酰凝胶(PAGE)电泳法、常压凝胶柱色谱法和高效液相凝胶色谱(HPGPC)法鉴定0P的纯度,得出结论:仙人掌多糖组分OP的所带电荷和分子量大小都表现出均一性。 3.仙人掌多糖的理化性质、分子量测定以及单糖组成分析 仙人掌多糖组分OP为淡黄色固体粉末;可溶于水、稀酸、稀碱、稀盐溶液,易溶于热水,不溶于乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂,且易被有机溶剂析出;比旋光度为[a]<20><,D>=+72.50;凝胶渗透色谱法(GPC)测定OP的重均分子量Mw为17259lDa;经HPLC-ELSD联用测定OP是由鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖三种单糖组成的杂多糖,其摩尔比为鼠李糖:阿拉伯糖:葡萄糖=1.00:2.98:2.57。 4.仙人掌多糖清除活性氧自由基作用研究 对仙人掌粗多糖和仙人掌多糖组分OP清除活性氧自由基作用进行研究,实验结果表明,仙人掌粗多糖和仙人掌多糖组分OP能够有效清除邻苯三酚的自氧化过程产生的超氧阴离子自由基,在较高浓度下仙人掌多糖可以作为良好的氧自由基清除剂;仙人掌粗多糖和仙人掌多糖组分OP能够有效抑制Fenton体系产生的羟基自由,比Vc清除羟基自由基的能力稍弱,是一种性能良好的羟基自由基清除剂;仙人掌粗多糖和仙人掌多糖组分OP能够有效抑制小鼠肝和鸡肝微粒体脂质过氧化物丙二醛的产生。
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