模拟胃癌外周血微转移免疫磁珠检测法的建立

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuguai19811025
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目的:探讨建立胃癌外周血微转移细胞的免疫磁珠检测法及其意义.方法:体外培养胃癌SGC-7901细胞,将胃癌细胞与PBMC及全血细胞混合,细胞混合液与单克隆抗体(抗CA199、CEA单抗)在4℃条件下作用90分钟,然后与包被羊抗鼠IgG的免疫磁珠(M-450)作用60分钟后,涂片,HE染色,观察不同单抗条件下细胞与免疫磁珠结合的情况,并计算玫瑰花环形成率.摸索最佳反应条件.模拟胃癌外周血微转移的模型,进行免疫磁珠技术灵敏度的检测.结果:胃癌SGC-7901细胞与IMB形成多个玫瑰花环且吹打不散,特异性好.随着抗CA199单克隆抗体和IMB浓度的增高,胃癌细胞与免疫磁珠结合率亦增高.当CA199单抗浓度为25μg/ml、免疫磁珠:肿瘤细胞达到20:1时结合率最高,玫瑰花环形成率达到90﹪.免疫磁珠技术敏感性较高,当PBMC与SGC-7901细胞之比为5×10<5>:1时可检测到恶性细胞.1ml外周血中有20个肿瘤细胞即可被检测出来.结论:免疫磁珠技术是一种简便、快速、敏感性强且临床实用价值高的检测技术,可提高胃癌转移的早期诊断率.
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