研究背景:TGFβ在胎肺发育过程中扮演着重要角色,其机制尚不明确。TGFβ能通过经典的Smads依赖途径使Smad2/3磷酸化并与Smad4形成复合物继而共同移位到细胞核中参与下游基因的调控。近年来,人们在成人主动脉平滑肌细胞、肺动脉平滑肌细胞及成年小鼠肺动脉平滑肌细胞中发现TGFβ诱导的Smad1/5/8蛋白磷酸化,但这种现象并不稳定。对于新生儿肺动脉平滑肌细胞中是否也存在TGFβ介导的BMP R-Smad信号通路尚无文献报道。目的:本课题组通过Western blot、邻近连接技术、细胞免疫荧光染色及RT-PCR方法,初步探讨子鼠肺动脉平滑肌细胞中TGFβ是否诱导Smad1/5蛋白磷酸化及其作用机制。方法:1.取出生第10天FVB/NCrl小鼠,原代子鼠肺动脉平滑肌细胞、纤维细胞,与CS54细胞、RFL6细胞共同构建体外细胞培养模型。然后用生理浓度的TGFβ1对细胞进行处理,通过Western blot方法检测各组细胞中pSmad1/5蛋白表达水平;邻近连接技术检测 FVB/NCrl 子鼠（P10）肺组织中 TGFβ-BMP-mixed Smad complexes 的表达情况。2.子鼠肺动脉平滑肌细胞经2.5 ng/ml TGFβ1或50 ng/ml BMP4处理1 h后,通过细胞免疫荧光学技术检测pSmad1/5的核迁移情况;RT-PCR方法检测TGFβ是否诱导子鼠肺动脉平滑肌细胞中Id1/2/3 mRNA的表达。3.首先用TGFβRI及BMPRI抑制剂对子鼠肺动脉平滑肌细胞进行处理,然后用western blot方法检测各组细胞中TGFβ诱导的pSmad1/5蛋白表达水平是否被抑制。结果:1.TGFβ诱导子鼠肺动脉平滑肌细胞、肺动脉纤维细胞、CS54细胞以及RFL6细胞中Smad1/5蛋白磷酸化,并且TGFβ-BMP-mixed Smad complexes表达表达于子鼠（P10）肺组织内。2.TGFβ诱导子鼠肺动脉平滑肌细胞中pSmad1/5的核迁移,并促进BMP R-Smad下游基因Id1与Id3的转录。3.TGFβ通过TGFβRI介导子鼠肺动脉平滑肌细胞中BMP R-Smad信号通路,ALK1也可能参与其中。结论TGFβ介导的BMP R-Smad信号通路可能参与调控肺发育与肺血管形成。