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目的:上皮性卵巢癌是一种高度恶性的妇科肿瘤,由于缺乏早期诊断方法,其五年生存率徘徊在30%左右。目前卵巢癌的治疗方法主要为彻底的肿瘤细胞减灭术和以铂类药物为主的化疗。但随着化疗时间的延长,癌细胞对铂类药物产生的耐药性及铂类药物尤其是顺铂的长期应用造成的肾毒性,也限制了铂类药物的应用,这使手术后治疗和化疗效果处于平台期,总的生存率没有明显提高,寻找有效而毒性小的抗癌药物成为临床治疗的迫切要求,这对降低患者的死亡率、提高患者的生存质量具有重要的临床意义。小白菊内酯（Parthenolide,PAR）是从传统药材菊科植物中提取的一种倍半萜内酯化合物,也是野甘菊的主要活性成分之一,用于治疗发热,偏头疼和关节炎有着悠久的历史。已有研究表明小白菊内酯是一种有效的核转录因子-κB（Nuclear transicription factor-κB,NF-κB）抑制剂,它可特定作用于Iκb激酶复合体,抑制NF-κB的活性。近年来的研究证实,小白菊内酯能在多种人类肿瘤细胞株中通过诱导凋亡引起细胞死亡,比如结肠癌、胰腺癌、肝癌和多发性骨髓瘤等,此外,小白菊内酯还能增强肿瘤细胞对抗肿瘤药物的敏感性,但目前小白菊内酯对卵巢癌作用的研究尚未见报道。本实验通过体外培养卵巢上皮性癌细胞株和卵巢癌铂耐药细胞株,观察小白菊内酯对上皮性卵巢癌细胞和卵巢癌耐药细胞增殖的影响;比较小白菊内酯处理两种细胞前后NF-κB的表达情况,研究NF-κB与卵巢上皮性癌细胞株和铂耐药细胞株的关系及小白菊内酯在卵巢癌细胞株中对其的作用;同时用小白菊内酯和顺铂联合作用于卵巢癌耐药细胞株,探讨小白菊内酯是否能增强卵巢癌耐药细胞株对顺铂的敏感性,为卵巢癌的治疗提供新的思路。方法:将人卵巢浆液性囊腺癌细胞株SKOV-3及其铂耐药细胞株SKOV-3/DDP置于37℃,饱和湿度为5%CO2,胎牛血清浓度为10%的RPMI1640培养基中常规培养,待两种细胞进入对数生长期后用于实验。1光镜观察:将不同浓度的小白菊内酯分别作用于SKOV-3和SKOV-3/DDP细胞株,在倒置显微镜下定时观察细胞生长的情况。2 MTT法:调整细胞浓度为5×104,以每孔200μl培养于96孔培养板中,待两种细胞进入对数生长期后,用不同浓度PAR（0、6.25、12.5、25、50,0、25、50、100、200μmol/L）分别作用SKOV-3和SKOV-3/DDP两种细胞株于不同时间（12、24、36、48h）,以PAR 0μmol/L为对照组,由于PAR是用二甲基亚砜（DMSO）溶解,故另设DMSO组。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测PAR对细胞的生长抑制作用。3免疫组化法:常规培养SKOV-3和SKOV-3/DDP细胞,培养72小时后,胰酶消化制作细胞涂片,待细胞贴壁后使细胞同步化24h,然后加25μmol/LPAR作用6h,然后进行染色,显色,用图像分析软件分析各组吸光度值,比较各组NF-κB的表达情况。4流式细胞术:采用碘化丙啶（propidium iodide, PI）标记的流式细胞术检测小白菊内酯是否能增强SKOV-3/DDP细胞对顺铂的敏感性。实验分组如下:①Control组:仅以含10%胎牛血清的RPMI-1640细胞培养液培养SKOV-3/DDP细胞②PAR组:8μmol/L PAR作用于SKOV-3/DDP细胞③DDP组:2.5μg/ml DDP作用于SKOV-3/DDP细胞;④PAR+DDP组:8μmol/L PAR和2.5μg/ml的DDP同时作用于SKOV-3/DDP细胞。5应用SPSS13.0统计软件进行数据分析。结果:1倒置显微镜下可见,不同浓度的小白菊内酯作用于SKOV-3和SKOV-3/DDP细胞后,随着PAR浓度的增加和作用时间的延长,细胞的密集度明显减少,其增殖活性明显降低,细胞形状逐渐由梭形变为圆形,细胞膜也由完整逐渐变为皱缩,圆形细胞逐渐增多。细胞体积普遍变小,胞质浓缩,细胞膜不完整,形态呈不规则,贴壁能力明显减弱,最后漂浮。2 MTT结果显示,不同浓度的小白菊内酯作用于SKOV-3和SKOV-3/DDP细胞后,随着PAR浓度的增加和作用时间的延长,两种细胞的增殖活性与对照组相比都有明显的减弱,差异均有统计学意义（均p<0.05）,最大浓度小白菊内酯组与DMSO组相比,增殖活性明显减弱,差异有统计学意义（p<0.05）。3细胞免疫组化结果显示:SKOV-3细胞在经过小白菊内酯处理前后比较,分析软件测得处理前的吸光度值（0.3857±0.012）低于处理后的吸光度值（0.4107±0.043）,差异有统计学意义（p<0.05）;SKOV-3/DDP细胞在经过小白菊内酯处理前后比较,分析软件测得小白菊内酯处理前的吸光度值（0.4207±0.017）低于处理后的吸光度值（0.5313±0.035）,差异有统计学意义（p<0.05）;SKOV-3和SKOV-3/DDP细胞在小白菊内酯处理前比较,SKOV-3细胞胞核及胞浆NF-κB蛋白的表达明显少于SKOV3/DDP细胞,SKOV3细胞株的吸光度值（0.3857±0.012）低于SKOV3/DDP细胞株的吸光度值（0.4207±0.017）,差异有统计学意义（p<0.05）;SKOV-3和SKOV-3/DDP细胞在小白菊内酯处理后比较,两细胞NF-κB蛋白的表达胞浆均多于胞核,但是SKOV3细胞胞核及胞浆NF-κB蛋白的表达仍然明显少于SKOV3/DDP细胞,SKOV3细胞株的吸光度值（ 0.4107±0.043 ）低于SKOV3/DDP细胞株的吸光度值（0.5313±0.035）,差异有统计学意义（p<0.05）。4 PI标记的流式细胞术检测结果显示:小白菊内酯联合顺铂能抑制SKOV-3/DDP细胞凋亡,阻滞细胞周期在S期⑴PAR组SKOV-3/DDP细胞的凋亡率（3.25±0.91）、DDP组细胞凋亡率（2.32±0.84）及PAR+DDP组细胞凋亡率（7.69±1.34）均明显高于Control组（1.21±0.65（）均p<0.05）,PAR组SKOV-3/DDP细胞的凋亡率（3.25±0.91）与DDP组细胞凋亡率（2.32±0.84）均低于PAR+DDP组细胞凋亡率（7.69±1.34）,差异有统计学意义（p<0.05）。⑵G0/G1期SKOV-3/DDP细胞数,PAR组（53.2±1.00）、DDP组（30.7±0.65）及PAR+DDP组（29.3±0.38）明显低于Control组（62.8±1.25）,差异有统计学意义（p<0.05）;S期SKOV-3/DDP细胞数,PAR组（26.1±1.56）、DDP组（56.2±0.73）及PAR+DDP组（50.9±2.33）均明显高于Control组（19±1.32）。结论:1小白菊内酯能抑制SKOV-3细胞的增殖,并具有时间-浓度依赖关系。同一浓度的小白菊内酯随着时间的延长对SKOV-3细胞的抑制作用增强。在同一时间点,小白菊内酯随着浓度的增大对SKOV-3细胞的抑制作用也增强。当应用12.5μmol/L小白菊内酯处理细胞36h后,其增殖抑制率达到74.22%。小白菊内酯作用36h的IC50为10.5μmol/L。2小白菊内酯能抑制SKOV-3/DDP细胞的增殖,并具有时间-浓度依赖关系。同一浓度的小白菊内酯随着时间的延长对SKOV-3/DDP细胞的抑制作用增强。在同一时间点,小白菊内酯随着浓度的增大对SKOV-3/DDP细胞的抑制作用也增强。当应用50μmol/L小白菊内酯处理细胞48h后,其增殖抑制率达到68.63%。小白菊内酯作用48h的IC50为31.8μmol/L。3 SKOV-3/DDP细胞核中NF-κB蛋白的表达量明显多于SKOV-3细胞核,推测NF-κB在细胞核中的表达量增加可能与卵巢癌的顺铂耐药有关。小白菊内酯作用于SKOV-3和SKOV-3/DDP细胞,能抑制其NF-κB的活性。4小白菊内酯和顺铂联合作用于卵巢癌耐药细胞株,能增强耐药细胞株对顺铂的敏感性,小白菊内酯单独或联合顺铂用药均能将SKOV-3/DDP细胞周期阻滞在S期,可能通过干扰SKOV-3/DDP细胞DNA的合成诱导细胞凋亡。