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目的:体外研究大鼠牙囊干细胞成骨分化能力,根据miR-335成骨相关基因表达量的改变情况,从而明确miR-335对牙囊干细胞的成骨分化的作用。方法:双向差速法体外分离培养大鼠牙囊干细胞,进行成骨诱导。用茜素红染色检测成骨分化的能力,进而用PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)检测miR-335的表达,并在瞬时转染miR-335 mimics(pre-miR-335)or inhibitor(anti-miR-335)后成骨诱导,用PCR和western-blot的方法检测成骨能力的改变。结果双向差速法培养的牙囊干细胞具有成骨样细胞分化能力。成骨诱导的牙囊干细胞中miR-335表达降低,转染miR-335 mimics后成骨能力降低,转染miR-335 inhibitor后成骨能力升高。结论:双向差速法培养的大鼠牙囊干细胞,可向成骨分化。在体外条件miR-335可以抑制牙囊干细胞的成骨分化。