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目的：本课题主要是建立并比较牛血清中易感染的外源病毒检查方法,牛血清中易感染的外源病毒分别是牛腹泻病毒(Bovine Viral Diarhea Virus)、牛腺病毒(Bovine Adenovirus)、牛细小病毒(Bovine parvovirus)、呼肠孤病毒(Reovirus)、副流感病毒型Ⅲ型(Parainfluenxa Virus type 3)及狂犬病病毒(Rabies)。方法：各种病毒的病毒量滴定分别用细胞病变(CPE)法,终点病变判定结果。实验中模拟待测牛血清培养体系,培养易感染的外源病毒,21天连传3代,每代7天终末分别采用细胞病变(CPE)法,免疫荧光抗体染色法(IFA)和PCR法进行检测。结果：PI3病毒在MDBK细胞上的病毒滴定量是5.6251gTCID50,REO病毒在MDBK细胞上的病毒滴定量是5.6251gTCID50, BAV病毒在MDBK细胞上的病毒滴定量是5.6251gTCID50, BVDV病毒在MDBK细胞上的病毒滴定量是4.51gTCID50, BPV病毒在MDBK细胞上的病毒滴定量是1.251gTCID50。在根据其各病毒含量,梯度稀释后接种于MDBK细胞,CPE法检出PI3一代病毒引起细胞全病变的最低病毒含量是：53.1TCID50, REO一代病毒引起细胞全病变的最低病毒含量是：530.1TCID50, BAV一代病毒引起细胞全病变的最低病毒含量是：133.4TCID50,BPV一代病毒引起细胞全病变的最低病毒含量是：177.8TCID50,BVDV一代病毒引起细胞全病变的最低病毒含量是：31.6TCID50; IFA法检出PI3一代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-6,即为0.42 TCID50,检出REO一代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-6,即为0.42 TCID50,检出BAV一代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-,即为4.2 TCID50,检出BVDV一代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-5,即为0.316 TCID50,检出BPV一代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-4,即为1.77 TCID50; PCR法检出PI3一代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-6,即为0.42 TCID50,检出REO一代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-6,即为0.42 TCID50,检出BAV一代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-6,即为0.42 TCID50,检出BVDV一代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-6,即为0.316 TCID50,检出BPV一代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10,即为0.177 TCID50; CPE法检出PI3二代病毒引起细胞全病变的最低病毒含量是:0.53TCID50, REO二代病毒引起细胞全病变的最低病毒含量是：53.1TCID50, BAV二代病毒引起细胞全病变的最低病毒含量是：13.34TCID50, BPV二代病毒引起细胞全病变的最低病毒含量是：1.8TCID50, BVDV二代病毒引起细胞全病变的最低病毒含量是：3.16TCID50; IFA法检出PI3二代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-7,即为0.042 TCID50,检出REO二代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-7,即为0.042 TCID50,检出BAV二代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-6,即为0.42 TCID50,检出BVDV二代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-5,即为0.316 TCID50,检出BPV二代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-2,即为0.177 TCID50; PCR法检出PI3二代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-7,即为0.042 TCID50,检出REO二代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-7,即为0.042 TCID50,检出BAV二代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-7,即为0.042 TCID50,检出BVDV二代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-7,即为0.032 TCID50,检出BPV二代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-3,即为0.018 TCID50;CPE法检出PI3三代病毒引起细胞全病变的最低病毒含量是：0.53TCID50, REO三代病毒引起细胞全病变的最低病毒含量是：5.3TCID50, BAV三代病毒引起细胞全病变的最低病毒含量是：1.334TCID50, BPV三代病毒引起细胞全病变的最低病毒含量是：1.778TCID50, BVDV三代病毒引起细胞全病变的最低病毒含量是：3.16TCID50; IFA法检出PI3三代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-7,即为0.042 TCID50,检出REO三代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-7,即为0.042 TCID50,检出BAV三代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-6,即为0.42 TCID50,检出BVDV三代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-7,即为0.032 TCID50,检出BPV三代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-2,即为0.177 TCID50; PCR法检出PI3三代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-7,即为0.042 TCID50,检出REO三代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-7,即为0.042 TCID50,检出BAV三代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-7,即为0.042 TCID50,检出BVDV三代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-7,即为0.032 TCID50,检出BPV三代病毒细胞荧光染色的最低病毒稀释度为10-3,即为0.018 TCID50。结论：CPE法、免疫荧光和PCR法结果趋势基本一致,综合结果表明,21天连传三代,可明显提高阳性病毒检出率,每传一代,对其所含的病毒可提高10倍的检出几率。对牛原材料未知病毒含量的检出具有重要意义。