【摘 要】
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该文选用了东农培育的玉米品种东农1028、,提取植物总DNA以及质粒psmRS-GFPCD、pmT5为模板,分别根据Geneband发表的玉米内对照基因—玉米肌动蛋白基因(actin of zea mays)和
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该文选用了东农培育的玉米品种东农1028、,提取植物总DNA以及质粒psmRS-GFPCD<,327>、pmT5为模板,分别根据Geneband发表的玉米内对照基因—玉米肌动蛋白基因(actin of zea mays)和选择标记链霉毒抗性基因(streptomycin)、新霉素磷酸转移酶基因(npt-Ⅱ)序列,利用Primer Premier5.0及Generuner引物设计软件设计出寡核苷酸引物,进行PCR扩增,产物谱带进行胶回收,将产物连接到pUC-18载体上,转化到Jm109菌株.提取重组质粒并进行酶切、PCR鉴定并进行序列测定,最终得到了三种基因的阳性克隆.在此基础之上,采用PCR法和斑点杂交方法进行转基因植物的检测.结果表明:PCR法转基因检测的下限为0.5﹪(w/w),即当受检材料中的转基因成分占非转基因成分等于或大于0.5﹪时可以检出.而斑点杂交检测结果证明:当材料转基因含量降低时,检测信号则明显降低,灵敏度较低.
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