背景真菌性角膜炎是一种致盲率高,由真菌感染引起的角膜病变,且主要发生在农村的青壮年劳动者。真菌性角膜炎的主要致病原因是植物性外伤引起的角膜病变,在既往的流行病学调查中发现,镰刀菌和曲霉菌是我国常见的致病菌。而在真菌性角膜炎的治疗中自身免疫的状态决定了真菌感染及预后的情况,在既往的研究中,对免疫细胞的研究主要是中性粒细胞,巨噬细胞,单核细胞和NK细胞等。而在近几年一种新的免疫细胞的发现可能为真菌性角膜炎相关的免疫细胞的参与和治疗提供了一个新的思路和方向,即ILCs细胞群。前期已证明角膜中至少存在ILC2s,以此我们希望通过早期对于ILC2s进行干预,观察真菌性角膜炎的疾病病程的变化,对不同时期的炎症细胞的变化影响及后期对角膜结构的影响,通过该实验进一步深入了解真菌性角膜炎发病的机制,为真菌性角膜炎的治疗提供新的思路。目的探究ILC2s对真菌性角膜炎修复及相关炎症细胞变化的影响。材料和方法取健康SPF级C57BL/6J小鼠,雄性,84只,8-10周龄,体重24-28g,使用裂隙灯检查双眼角膜情况。取其中42只小鼠进行结膜下注射Anti-CD90.2,制备祛除ILC2s。将小鼠分为Anti-CD90.2组和WT组,对各组小鼠进行真菌性角膜炎模型的制作。分别在12h、24h、48h、72h、96h、120h及168h对各组小鼠角膜进行临床评分及拍照,通过随机分组的方法将小鼠分入12h、24h、48h、72h、120h及168h各亚组8只眼(n=8)。在对应时间点处死小鼠并取材,进行角膜整铺片分别用PE anti-mouseF4/80,FITC Rat anti-mouseGr-1标记巨噬细胞和中性粒细胞,应用研究型荧光显微镜对铺片进行拍照,计算中性粒细胞和巨噬细胞的面积。另外,分别在24h、48h、72h、96h、120h及168h各亚组4只眼(n=4),对各组眼球取材后放入固定液中,制作病理切片并进行HE染色,观察不同时间点角膜结构的变化。使用SPSS24.0统计软件进行统计分析。结果1.相同时间点Anti-CD90.2组和WT组临床评分比较,真菌感染12h,24h,36h,48h角膜病变临床评分比较无明显统计学差异(P=0.626,0.389,0.306,0.106>0.05);真菌感染72h,120h,168h角膜病变的临床评分比较,差异具有统计学意义(P=0.025,0.014,0.005<0.05)。在真菌感染48h后Anti-CD90.2组角膜病变的临床评分明显低于WT组,角膜透明度同样优于WT组。2.两组中性粒细胞均在真菌感染早期增加,36h角膜中性粒细胞浸润到达峰值,而后开始逐渐下降。对Anti-CD90.2组和WT组中性粒细胞角膜浸润面积同一时间点相比,12h,24h,36h及168h差异均具有统计学意义(P=0.000);72h,120h差异亦同样有统计学意义(P=0.002,0.017<0.05)。3.对两组巨噬细胞进行统计发现,在WT组巨噬细胞随着真菌感染时间的浸润量逐渐增加,72h后稍有下降。但Anti-CD90.2组则是在真菌感染初期巨噬细胞浸润量变化不明显,真菌感染36h、24h和12h比较差异无统计学意义(P=0.080,0.946>0.05)。通过对Anti-CD90.2组和WT组巨噬细胞角膜浸润同一时间点相比,在真菌感染12h、24h、36h两组间各时间点均无统计学差异(P>0.05);而在真菌感染48h、72h、120h、168h的两组各时间点比较具有统计学意义(P=0.000)。结论1.ILC2s增加了真菌性角膜炎角膜病变的严重程度及穿孔率。2.ILC2s加强中性粒细胞及巨噬细胞的对病灶区的浸润程度。