荧光假单胞菌Pf-5(Pseudomonas protegensPf-5)是一种重要的植物根际共生菌，它能够产生多种具有抗菌作用的活性次级代谢产物，包括藤黄绿脓菌素(Plt)、2，4-二乙酰基藤黄酚(Phl)、硝吡咯菌素(Prn)、嗜铁素等。这些次级代谢产物能拮抗不同的病原菌，在农作物土传病害的生物防治研究中具有重要意义。野生型菌株中各类活性代谢产物的产量通常较低，在生物防治应用中效果有限。当前，通过核糖体工程技术(Ribosome engineering)等手段进行菌株改良提高次级代谢产物产量是一条十分有效的途径。　　为了提高Pf-5菌株中活性的次级代谢产物的产量，本研究利用核糖体工程技术在高浓度的利福平筛选下，分离得到利福平自发抗性突变株60株。通过比较原始株Pf-5和突变株的抑菌效果发现，其中7株突变菌株较原始菌的抗真菌能力增强。对这7株突变菌株的DNA序列进行测序分析，发现均在编码RNA聚合酶β亚基的rpoB基因出现点突变，保守区域rif-clusterⅠ区间第1591位的胞嘧啶突变为腺嘌呤，相应的编码氨基酸残基由组氨酸突变为天冬酰胺。利用HPLC对次级代谢产物产量进行比较分析，结果表明相比于原始菌株，突变菌R55的2个主要抑菌活性代谢物（B和D）合成能力都有不同程度的提高:其中产物B提高了2.5倍左右，产物D提高了1.4倍左右。利用质谱等手段测定表明:产物B和D分别为:藤黄绿脓菌素、2，4-二乙酰藤黄酚。抑菌实验表明产物藤黄绿脓菌素、2，4-二乙酰藤黄酚对烟草黑胫病菌和枇杷炭疽病菌都显示了不同程度的抑制效果。此外，本研究还在Pf-5菌株中过表达了R55的ropBR基因，构建了工程菌株Pf-rpoBR。工程菌能在高浓度的利福平抗性板上生长，CAS平板实验发现工程菌的嗜铁素产量有较大幅度的提升。　　本研究以荧光假单胞菌Pf-5为出发菌株，引入利福平抗性突变位点，获得一株两种抗生素产量同时提高且抑菌活性大幅增强的突变株R55，并鉴定了其突变位点，经过反复传代验证，突变株的利福平抗性能稳定遗传。研究结果体现了核糖体工程技术在革兰氏阴性细菌选育上的重大潜在应用价值。