益生菌发酵健胃消食片药渣及其对脾虚小鼠肠道调整功能的初步研究

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中草药是我国的重要传统产业之一。近年来,中草药制药行业的大量废弃药渣成了制约其绿色环保发展的难题之一。药渣作为一种资源,含有丰富的粗纤维、粗蛋白、粗脂肪、矿物质以及许多生理活性成分,具有较高的营养和药用价值。将药渣随意丢弃,不仅污染了环境,而且是对中草药资源的一种严重浪费。本课题以江中牌健胃消食片药渣为研究材料,首先从实验室保藏的菌株中筛选出四株能够在药渣基质中良好生长的益生菌,然后根据他们的不同特性进行组合,用于药渣发酵。通过比较发酵前后药渣的成分变化,选择发酵效果最好的菌株组合,用其发酵液进行动物实验,以验证其功能。以期开发出具有一定功效的产品。具体研究结果如下:益生菌能够在中药渣基质中良好生长是利用益生菌发酵药渣的前提。通过传统的活菌计数法,比较了6株益生菌,即发酵乳杆菌MF4 (Lactobacillus fermentium MF4)、植物乳杆菌M3 (Lactobacillus plantarum M3)、罗伊氏乳杆菌MJ5(Lactobacillus reuteri MJ5) 、乳酸片球菌MA6 (Pediococcus acidilactici MA6)、鼠李糖乳杆菌CLT09 (Lactobacillus rhamnosus CLT09)、长双歧杆菌NCC2705 (Bifidobacterium longum NCC2705)在不同配比药渣基质、pH及厌、需氧条件下的生长状况。结果表明,6株益生菌在不同配比药渣基质中均能存活,然而在水:鲜渣=3:1和水:干渣=10:1的药渣基质中生长情况较好,而pH及厌、需氧条件对六株益生菌在药渣基质中的生长状况影响较小;另外通过降解率实验,测定了四株降解菌,即枯草芽孢杆菌DC002 (Bacillus subtilis DC002)、米曲霉DC008 (Aspergillus oryzae DC008)、木霉S013 (Trichoderma S013)、酿酒酵母P001 (Saccharomyces cerevisiae P001)对药渣基质的降解能力,结果显示四株降解菌对药渣基质的降解率都在25%以上,其中枯草芽孢杆菌DC002和米曲霉DC008的降解率最高,达到了28%。不同菌株发酵中药渣的效果有明显的差异。首先,选择具有强降解能力的菌株(枯草芽孢杆菌DC002和米曲霉DC008),以及常用于治疗肠道菌群失调的益生菌(鼠李糖乳杆菌CLT09、长双歧杆菌NCC2705)作为发酵菌株,并根据四株菌的不同特性进行组合。通过比较发酵前后药渣气味、颜色、pH、TTA、抗氧化能力及还原糖和蛋白质含量的变化,发现枯草芽孢杆菌DC002+米曲霉DC008+鼠李糖乳杆菌CLT09+长双歧杆菌NCC2705 (48 h)的发酵效果最佳。为了验证四联菌(枯草芽孢杆菌DC002+米曲霉DC008+鼠李糖乳杆菌CLT09+长双歧杆菌NCC2705)发酵健胃消食片药渣的效果,以大黄造模的具有肠道菌群失调症状的脾虚型小鼠为研究对象,用四联菌发酵药渣上清灌胃治疗脾虚小鼠,并以健胃消食片作对照,通过对小鼠表观特征的观察和肠道菌群的监测,比较四联菌发酵药渣上清和健胃消食片对脾虚型小鼠肠道菌群的调整作用。实验结果表明,四联菌发酵健胃消食片药渣上清对脾虚小鼠肠道菌群具有一定的调节作用。本研究为开展药渣的绿色生态循环利用研究提供了一种借鉴,具有潜在的应用前景。
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