喜树(Camptothecaacuminate)为乔本植物珙桐科喜树属,主要分布于华东、西南、东南等气候温润地带,华南地区常有栽培,用于中药配方及提取。其中,喜树叶、果、皮等部位均含有抗癌物质喜树碱(Camptothecin,CPT),主要对消化系统中的直肠癌、胃癌、肝癌等恶性肿瘤有抑制作用。尽管有关喜树类的活性物质已初步描述,但更深入的对其分离提取及抗氧化性能研究未见系统的报道。本论文以喜树为研究材料,建立了喜树碱含量的测定方法,优化了分离提取工艺,分析了其抗氧化活性,论文包括以下内容:1、文献综述。从生物碱的概念出发,论述了喜树碱的基本性质、结构及其修饰、药理活性、分离提取方法以及含量测定方法等,阐明了本研究的意义。2、荧光法测定喜树碱含量方法的建立。喜树碱是一种荧光化合物,利用其自身特点,从精密度、重现性、回收率、干扰物等方面,对喜树碱荧光测定法进行了分析研究。结果表明:喜树碱的荧光强度与含量之间在研究的浓度内(6.0×10-7～3.0×10-6mol/L)呈线性递增,该方法的检测限达到1.65×10-8mol/L,且用荧光法测定CPT时简便快速,精密度、重现性、加标回收率、稳定性均较符合实验要求。据此,建立了适用性强、稳定性好的荧光分析法,该法适用于提取物中CPT的定量分析。3、喜树碱提取参数优化。为从喜树样品中提取出得率高的CPT,本章通过单因素、响应面建模及正交实验三种方法,设计不同的提取方案来优化最佳的提取方法。响应面实验考察了超声时间、甲醇浓度、料液比与荧光强度之间的关系,分析得出三因素对喜树样品中CPT荧光强度的影响大小为:料液比(C)>甲醇浓度(A)>超声时间(B),且彼此间有较强的交互作用。通过综合分析研究得出CPT最佳提取方案为:甲醇浓度65%,超声1h,料液比1:10,所提取的CPT得率最高,并利用该提取方案进一步对样品中喜树碱的含量进行了测定,获得了喜树在不同生长时期、不同取材部位,喜树碱积累量与样品材料之间对应的关系,为进一步开发利用喜树材料提供了可靠地理论依据。4、喜树碱的分离纯化。本章采用柱层析技术对CPT进行了进一步的分离。研究了柱填料、洗脱剂及上样量等实验影响条件,利用硅胶柱层析技术,以二氧化硅作为固定相,采取湿法装柱、干法上样的方式,以二氯甲烷:甲醇为洗脱剂进行梯度洗脱,对喜树果粗提物中的CPT进行分离,并对纯度进行了分析比较。结果表明:分离后CPT的得率为21.7%,纯度为90.2%。5、喜树碱抗氧化活性研究。通过DPPH自由基清除能力、总抗氧化活性及总还原能力对分离得到的CPT进行抗氧化活性测定,并用IC50值表示其抗氧化能力,同时将抗坏血酸作为阳性对照。实验结果表明:CPT清除DPPH自由基能力的IC50值为0.12 mg/mL,总抗氧化活性及总还原力较强,证明了 CPT具备良好的体外抗氧化能力。