谷氨酰胺对放射动物肠粘膜屏障保护作用的实验研究

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目的:谷氨酰胺对创伤、烧伤、感染等应激状态下及全肠外营养时对肠粘膜屏障功能影响的研究报道近年来比较多,认为谷氨酰胺对肠粘膜屏障有保护作用。放射治疗是某些肿瘤的重要的治疗手段,放射导致的肠道损伤是肿瘤放疗中常见的并发症之一,虽然国外已有就放射情况下谷氨酰胺对肠粘膜屏障保护作用的研究报道,但资料较为零散。本实验研究的目的旨在从病理结构和功能上对谷氨酰胺对放射损伤动物肠粘膜屏障的保护作用作较深入的观察,并就谷氨酰胺对放射动物蛋白质代谢的影响作初步探讨,以进一步证实谷氨酰胺对放射损伤动物的有益作用,为谷氨酰胺的临床应用提供实验依据。方法:体重159.4±9.21g的Wistar雄性大鼠30只,随机分三组,每组10只,分别为对照组(Control组)、添加谷氨酰胺照射组(+GLN组)、未添加谷氨酰胺照射组(–GLN组)。Control组和–GLN组在常规大鼠饲料的基础上按饲料重量添加3%酪蛋白,+GLN组添加3%谷氨酰胺,+GLN组和–GLN组大鼠在喂养至第15天给予9.0Gry的60Coγ全身照射。三组大鼠按各自饲料喂养至实验第20天全部髂动脉放血致死,取小肠、肠系膜淋巴结及血清作以下指标测定:1. 空肠粘膜光镜和电镜病理形态学观察。2. 肠道细菌移位率(BT)。3. 肠粘膜上皮细胞(IECs)DNA、蛋白质含量。4. 血清内毒素含量。<WP=8>5. 血清还原型谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)的测定。6. 血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)、视黄醇结合蛋白(RBP)和转铁蛋白(TRF)含量,并对实验期间动物体重变化作动态观察。结果:1. –GLN组肠粘膜变薄、萎缩,绒毛变短,粘膜固有层大量炎性细胞浸润,扫描电镜可见绒毛顶端溃疡明显,+GLN组肠粘膜病理改变较轻。形态学定量比较表明,+GLN组肠粘膜绒毛平均高度、平均面积均明显大于–GLN组。2. 淋巴结细菌培养结果表明,肠道细菌移位率Control组为12.5%、+GLN组22.2%、–GLN组70.0%,+GLN及–GLN组间差异非常显著(P<0.01),–GLN组与Control组相差显著(P<0.05),+GLN组与Control无明显统计学差异。3. 血清内毒素Control组为249.7±23.44Eu/L,+GLN组为422.7±54.12Eu/L,–GLN组526.8±36.14Eu/L,三组间存在显著或非常显著的差异。4. Control组、+GLN组、–GLN组血清GSH分别为11.18±2.74μmol/l、 8.13±2.66μmol/l、4.684±1.38μmol/l,+GLN组与–GLN组明显低于Control组,但+GLN组明显高于–GLN组(P<0.01);三组血清SOD分别为177.11±5.68μmol/l 、176.4±6.65μmol/l、167.1±7.95μmol/l,+GLN组明显高于–GLN组(P<0.01),与Control组相差不显著。–GLN组与Control组相差非常显著(P<0.01)。5. +GLN组与–GLN组、Control组的肠粘膜上皮细胞DNA及蛋白质含量均无显著差异,–GLN组与Control组相比,DNA含量也无显著差异,但蛋白质含量差异显著(P<0.01)。6. 实验第14天(照射前1天)动物称重,三组动物体重均为净正增长,组间无显著差异。实验第20天,与照射前相比,Control组增长+14.0±4.14g,+GLN组减少-28.5±6.59g,–GLN组减少-36.5±8.83g。可见:照射之后,+GLN组和–GLN组动物体重均显著低于Control组,但+GLN组体重损<WP=9>失显著低于–GLN组(P<0.05)。血清TP浓度+GLN组与–GLN组间无明显差异,但该两组动物均显著低于Control组(P<0.01), –GLN组的血清ALB浓度显著低于Control组(P<0.01),+GLN组与Control组差异不显著。–GLN组的血清RBP、PA均显著低于Control组(P<0.05、P<0.01),+GLN组与Control组相差不显著,三组间血清TRF无显著差异。结论:实验结果表明,饲料中添加谷氨酰胺可减轻肠粘膜结构的急性放射损害,维持肠粘膜屏障对细菌及其内毒素的防御功能,提高放射损伤动物的抗氧化能力,并提示对减少肠粘膜上皮细胞内蛋白质的丢失、促进肝脏蛋白质的合成和改善机体整体营养状况都有积极作用
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