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目的:1.探讨EOW对铜绿假单胞菌ATCC15442的杀菌机理,并与2%戊二醛和生理盐水进行比较;2.探讨EOW对C57BL/6小鼠背部皮肤氧化损伤情况,并3%H2O2与生理盐水进行比较。方法:1.首先进行杀菌效果检测,测定EOW杀菌效果与2%戊二醛相比是否有统计学差异;用EOW、2%戊二醛、生理盐水分别作用于铜绿假单胞菌ATCC15442,达到作用预定时间后采用二喹啉甲酸法测定EOW、2%戊二醛和生理盐水对铜绿假单胞菌作用后细菌蛋白渗漏情况;随机扩增多态性DNA法比较消毒剂及生理盐水作用后细菌DNA的变化;以Fluo-3 AM钙离子荧光染色激光共聚焦扫描显微镜检测细菌细胞膜钙离子渗漏情况。2.选取全雌性6~8周龄C57BL/6小鼠30只,随机均分为三组:阴性对照组(生理盐水),阳性对照组(3%H2O2),试验组(EOW)。消毒剂及生理盐水连续涂抹小鼠颈背部皮肤7d后,取小鼠背部皮肤组织进行HE染色光学显微镜观察,并检查抗氧化损伤指标超氧化物歧化酶(SOD)酶活力、丙二醛(MDA)含量,提取皮肤组织RNA进行反转录荧光实时定量PCR检测细胞因子TNF-α,IL-6表达情况。结果:1.EOW及2%戊二醛对铜绿假单胞菌标准菌株ATCC15442作用30 s杀灭率大于99.00%,作用60 s杀灭率可达100%,两消毒剂对铜绿假单胞菌ATCC15442杀菌效果差异无统计学意义(p>0.05)。2.EOW,2%戊二醛及生理盐水对铜绿假单胞菌ATCC15442作用60 s后经二喹啉甲酸法检测蛋白渗漏量分别为(96.00±7.42)、(216.97±10.35)、(94.15±7.49)μg/m L,总体比较有统计学差异,其中EOW与生理盐水对照组比较蛋白渗漏量无显著差异(p>0.05),2%戊二醛作用60 s后所致蛋白渗漏显著高于EOW及生理盐水对照组(p<0.001);3.EOW处理铜绿假单胞菌ATCC15442 60 s后经随机多态性扩增DNA电泳图谱与生理盐水对照组相比无明显差别,均在500~1000kb间显示亮度较高的密集条带,2%戊二醛作用60 s后细菌DNA无扩增条带显示;4.EOW及2%戊二醛作用后钙离子荧光强度显著低于生理盐水对照组(p<0.0001)。5.EOW、3%H2O2及生理盐水涂抹C57BL/6小鼠背部皮肤HE染色观察细胞形态无肉眼可见差异,而H2O2组表皮厚度明显较EOW及生理盐水对照组增厚(p<0.01);6.EOW及生理盐水对照组两组间C57BL/6小鼠背部皮肤组织超氧化物歧化酶(SOD)活力无显著差异(p>0.05),且均高于H2O2组SOD酶活力(p<0.005);7.EOW及生理盐水对照组C57BL/6小鼠背部皮肤组织丙二醛(MDA)含量无统计学差异(p>0.05),并且均显著低于H2O2组(p<0.001);8.EOW组及H2O2组小鼠背部皮肤组织IL-6与TNF-α表达量无统计学差异(p>0.05),但均显著低于生理盐水对照组(p<0.001)。结论:1.EOW与2%戊二醛对铜绿假单胞菌ATCC15442杀菌效果无统计学差异;2.推测EOW的杀菌机理是使铜绿假单胞菌细胞膜通透性受到一定程度损伤致使Ca2+泄漏,但未能造成蛋白质泄漏;3.EOW对铜绿假单胞菌的DNA无明显损伤作用,细菌DNA可能并非EOW杀菌靶点;4.与消毒剂3%H2O2相比,EOW及生理盐水连续使用7天对皮肤未造成氧化损伤,而3%H2O2可使表皮厚度增加,皮肤组织中SOD酶活力降低,MDA含量增加,对皮肤存在氧化损伤。因此,EOW的皮肤安全性优于3%H2O2;5.EOW与3%H2O2可降低皮肤组织内IL-6及TNF-α表达,推测与消毒剂作用于背部皮肤后局部菌群发生改变,使得局部T细胞介导的免疫功能抑制,下调细胞因子表达有关。