论文部分内容阅读
防御素(defensins)是广泛分布于动物和植物界的一类富含半胱氨酸的阳离子抗菌肽，是生物体内先天性免疫的重要组成成分。根据防御素的分子结构特征和来源不同可分为α-防御素、β-防御素、θ-防御素、昆虫防御素和植物防御素五种类型。其中β-防御素在人、哺乳动物和禽类体内的上皮组织中被发现有广泛表达。
本研究首先通过反刍动物β-防御素的cDNA的保守序列设计引物，从驯鹿舌黏膜上皮组织中提取总RNA，采用RT-PCR(RevetseTrariscriptionPCR)技术扩增出reBD-1(reirideerβ-defensin-1)cDNA的中间片段，接着我们采用RACE(RapidAmplificationofcDNAEnds)法，成功的扩增了驯鹿β-防御素reBD-1的cDNA全序列。
reBD-1cDNA全序列长372bp，其中包含192bp的开放读码框(OpeningReadingFrame，ORF)，44bp的5’非翻译区(5’UTR)，118bp的3’非翻译区(3’UTR)以及poly(A)15。该ORF编码64个氨基酸残基的reBD-1前原肽，其中包含20个氨基酸残基的信号肽、6个氨基酸残基的前片段和38个氨基酸残基的成熟肽。在预测的38个氨基酸残基的成熟肽中有10个带正电荷的氨基酸残基(6个精氨酸R，3个赖氨酸K，1个组氨酸H)，没有带负电荷的氨基酸残基，因此reBD-1成熟肽是阳离子肽。
核酸序列及氨基酸序列的同源性分析表明：reBD-1与牛的β-防御素同源性最高，与山羊、绵羊和骆驼的β-防御素之间的同源性次之，与人和猪的β-防御素的同源性最低。由此可以看出reBD-1无论是核酸序列还是氨基酸序列，在进化关系上与其它反刍动物的β-防御素近，与人和猪的较远。