60Coγ射线照射大鼠涎腺组织后Mrell蛋白表达及涎腺放射敏感性的实验研究

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目的:大鼠腮腺和颌下腺腺泡细胞经6Gy、9Gy、12Gy、15Gy等单次不同剂量60Coγ射线照射后2h各组Mre11基因及蛋白表达与未照射组比较,观察射线照射对不同类型涎腺上皮细胞Mre11基因及蛋白的表达变化,检测Mre11在正常不同类型涎腺上皮细胞中的定位分布;从基因和蛋白水平探讨大鼠涎腺细胞经照射后Mre11基因及其蛋白的表达改变。方法:选取近交系雄性Wistar大鼠60只,采用完全随机数字法按单次照射0Gy、3Gy、6Gy、9Gy、12Gy、15Gy剂量分成6组、每组10只。以60Coγ射线为放射源,头颈部为放射野,其他部位受铅块保护,采用分割照射法,模拟人体照射的方法。照射后2h收集大鼠两侧腮腺和颌下腺组织。用RT-PCR技术检测不同类型涎腺上皮细胞Mre11mRNA表达情况,以Mre11/β-actin进行Mre11基因表达水平半定量分析。用免疫组化法检测Mre11亚单位的蛋白表达分布,并采用Image-Pro Plus5.0软件分析测定各组的平均光密度值(mOD)。用透射电镜观察不同类型涎腺上皮细胞超微结构变化。结果:RT-PCR检测大鼠涎腺腺泡细胞分别经OGy、3Gy、6Gy、9Gy、12Gy、15Gy照射后2小时Mre11mRNA半定量灰度值经单因素方差分析,P值分别为0.776(P>0.05)和0.954(P>0.05),差异无统计学意义,即各组之间Mre11mRNA表达无统计学差异。免疫组化法检测大鼠涎腺组织经3Gy、6Gy、9Gy、12Gy、15Gy等不同剂量辐射后,各剂量组Mre11蛋白表达强度由平均光密度值(mOD)表示,经单因素方差分析(one way ANOVA),腮腺和颌下腺组内比较P<0.05,Mrell蛋白表达差异有统计学意义。并且可观察到腮腺和颌下腺Mre11蛋白的表达都是随着剂量的增加先增强后又逐渐减弱,腮腺中Mrell蛋白表达强度在9Gy时达到最强,其余组表达强度与未照射组水平接近,颌下腺在6Gy时表达最强。透射电镜观察随着剂量的增加,大鼠腮腺腺泡细胞胞质肿胀、空泡变性和坏死明显加重,间质血管充血、肿胀及变性逐渐加剧,未见到再生、恢复的变化。结论:治疗剂量的60Co,Y照射对正常涎腺组织有损伤,主要作用于腺泡细胞和间质血管,损伤的程度具有剂量依赖性,呈不可逆的损伤。大鼠涎腺细胞Mre11蛋白的表达与辐射剂量以及组织类型有关,腮腺的敏感性较颌下腺强,随剂量的增加先增强后减弱。Mre11mRNA的表达与照射剂量递增无相关性。
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