研究背景进入21世纪后,糖尿病的患病率在不断上升。糖尿病及相关的急、慢性并发症不仅会对患者的生活质量以及生产能力造成严重影响,还会因为医疗费用给患者家庭和社会造成了沉重的负担。糖尿病肾脏病(Diabetic kidney disease,DKD)是糖尿病常见且严重的慢性微血管并发症之一。糖尿病肾脏病的发病机制非常复杂,至今尚未完全明确。目前治疗糖尿病肾脏病的方法有:严格控制血糖和血压、使用肾素-血管紧张素-醛固酮系统抑制剂、服用降脂药物等,以及改善生活方式等综合管理,但上述治疗手段仅能延缓却未能阻断DKD的进展。因此,进一步探索DKD的发病机制,寻找新的治疗靶点,已成为当今医学领域研究的热点与难点。艾塞那肽(Exendin-4)是一种胰高血糖素样肽受体激动剂,研究发现Exendin-4除了保护胰岛细胞、降低血糖、减轻体重的作用以外,还具有保护肾脏的作用。近年的研究发现,体内棕色脂肪(brown adipose tissue BAT)的含量增多或活性增加可以减轻胰岛素抵抗及体内炎症情况。同时,BAT还是一个多功能的内分泌器官,分泌的多种脂肪因子参与全身代谢调节,包括对肾脏代谢的调节。本课题组前期实验证明棕色脂肪移植亦可改善2型糖尿病小鼠肾病和减少尿白蛋白。国内研究发现Exendin-4可增强BAT代谢,促进体外培养的棕色脂肪细胞分化。然而,国外对Exendin-4脂肪组织棕色化的研究结果并不一致。本课题组前期研究中也发现Exendin-4对体外培养的棕色脂肪细胞分化无明显作用。Exendin-4是否通过BAT改善糖尿病肾病或具有独立于BAT的肾脏保护作用目前尚不明确,故本试验通过Exendin-4干预和棕色脂肪移除来探讨BAT在Exendin-4干预糖尿病小鼠肾病中的作用。研究目的探讨BAT在Exendin-4防治糖尿病小鼠肾病中的作用研究方法47只5～6周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分成正常对照(Control)组8只,糖尿病(DM)组39只,正常对照组小鼠正常饮食,糖尿病组小鼠进行造模(HFD*4w+stz+HFD*4w),第9周造模成功后进行分组并干预。DM组随机分为糖尿病对照组(DM-con)、糖尿病Exendin-4干预组(DM+E4)、糖尿病棕色脂肪移除组(DM+Exc)、糖尿病棕色脂肪移除并Exendin-4干预组(DM+Exc+E4),每组9-10只。实验期间观察小鼠精神状态和活动情况,每周测量体重、进食量、随机血糖,代谢笼定期收集小鼠24小时尿液。给药8周后,于第18周戊巴比妥钠麻醉后处死小鼠,收集小鼠血液、肾脏、脂肪组织等标本,一部分快速放入液氮后转存-80℃冰箱,一部分组织于4%中性福尔马林固定。观察各小鼠血糖、体重、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、甘油三酯的水平变化。采用RT-PCR法检测小鼠肾皮质FN、TGFβ1、COL1的mRNA表达,ELISA法测定小鼠24h尿白蛋白、8-OHdG含量。PAS、Masson染色法观察小鼠肾脏组织形态学变化。统计学分析数据均以均数±标准差表示,采用SPSS 19.0统计软件进行处理。多个样本均数的比较使用One-Way ANOVA,方差齐性的数据使用LSD法进行多重比较,方差不齐的数据使用Welch法进行近似方差分析,使用Dunnett’s T3法进行多重比较,认为P<0.05为差异具有统计学意义。结果Exendin-4可降低2型糖尿病小鼠的血糖水平,但并未达到显著的统计学差异。无论是否移除BAT,Exendin-4均可显著降低2型糖尿病小鼠的血甘油三酯水平。Exendin-4可明显降低BAT移除的2型糖尿病小鼠的血LDL-c水平。Exendin-4可显著降低2型糖尿病小鼠的尿白蛋白及8-OHdG水平,延缓肾病进展。BAT移除能加剧2型糖尿病小鼠的肾脏纤维化,但仅在COL1表达具有显著的统计学差异;无论是否移除BAT,Exendin-4干预均可显著降低2型糖尿病小鼠的肾脏纤维化指标。结论Exendin-4可显著降低2型糖尿病小鼠的血甘油三酯水平,降低尿白蛋白,改善肾组织纤维化,延缓糖尿病肾病进展。Exendin-4对糖尿病的肾脏保护作用可能不依赖于BAT。