HBV(hepatitis B virus)感染是我国肝硬化及肝癌的主要诱发因素。HBV根据全基因序列异质性≥8%或S基因序列≥4%分为10个基因型(A、B、C、D、E、F、G、H、I、J)。HBV DNA具有特殊的结构,决定了HBV自然状态下的高突变性。HBV病毒主要寄生到细胞中进行繁殖,且难以短时间内被清除,因此一般药物很难对HBV起效。当今用于治疗HBV的药物主要为干扰素和核苷酸类似物(nucleotide analogues,NAs)两大类。因NAs可以口服且疗效相对较好被当今广泛应用,但NAs的靶点在HBV聚合酶和反转录酶区,长期持续使用,在药物选择性压力下会增加逆转录区产生耐药性突变。近期研究发现,未治疗患者血清中也检测到HBV耐药突变位点,未治患者与经治患者基因型分布有差异,且耐药发生率也不同。未治患者HBV DNA载量与基因型及耐药突变位点有相关性。因此HBV患者治疗前及治疗过程中行基因型及耐药监测,能为临床合理用药提供有利的证据。目的:1.检测HBV未治患者和经治患者的HBV基因型及NAs耐药突变位点,为HBV患者NAs治疗策略制定提供依据。2.探讨HBV未治患HBV DNA载量与HBV基因型及NAs耐药之间的相关性,为未治患者NAs治疗策略制定提供依据。方法:74例HBV未治患者和66例经治患者经PCR反向斑点杂交法检测基因型及NAs耐药突变位点,对两组患者不同基因型及耐药位点进行比较分析。后期追加未治患者至205例,行HBV DNA载量测定和PCR反向斑点杂交法检测未治患者基因型及NAs耐药突变,根据未治疗患者HBV DNA载量IU/ml的Log进行分组(高、中、低),对不同组间基因型分布及耐药分布差异进行比较分析。随机抽取25例患者样本进行基因测序,测序结果与反向斑点杂交结果对比,检验反向斑点检验的准确性。所有数据使用SPSS16.0统计软件进行统计学处理。结果:1.未治患者与经治患者研究结果:HBV DNA载量>10~3IU/ml(Log>3.00),未治患者74例,男49例,女25例,年龄36.432±12.941(岁)和经治患者66例,男53例,女13例,年龄38.667±14.812(岁)(性别比较χ~2=3.501,P=0.0613;年龄比较t=1.043,P=0.302)。HBV B型占未治组的66.216%和经治组的59.091%,为主要基因型。未治组以阿德福韦酯(adefovir,ADV)耐药为主,经治组以拉米夫定(lamivudine,LAM)耐药为主,且HBV C型耐药突变未治组低于经治组(χ~2=4.268,P=0.0388)。未治组多耐药位点突变4例(5.405%)低于经治组16例(24.242%)(P<0.05)。2.HBV未治患者HBV DNA载量、基因型及耐药研究结果:HBV DNA载量>10~3IU/ml(Log>3),未治患者共205例(男127例,女78例;年龄36.79±13.39)。未治患者主要基因型为B型。HBV B型以HBV DNA低载量为主,C型以HBV DNA高载量为主。所有未治患者HBV DNA低载量患者均未检测到耐药,其中HBV DNA高载量发生耐药7例与HBV DNA中载量发生耐药43例差异有统计学意义(P<0.05)。C型及混合基因型(B/C型、B/D型)仅HBV DNA中载量中出现耐药突变。B型HBV DNA中载量耐药与HBV DNA高载量差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.未治患者与经治患者均以HBV B型为主。未治患者也检测到耐药位点,经治组多位点耐药率较未治组高。HBV患者治疗前及治疗过程中行基因型及耐药监测有利于为患者提供最佳治疗方案,对成功治疗HBV非常重要。2.未经治疗患者HBV DNA载量与HBV基因型及耐药均有一定的关系。耐药主要发生在HBV DNA中载量,且主要集中于混合基因型。因此在HBV患者接受治疗前行基因型及耐药检测为提供最佳治疗方案具有重要意义。