【摘 要】
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通过转录因子调控功能基因的表达是植物抗逆应答反应的关键环节。MYB转录因子是植物体内最大的转录因子家族之一,它在植物抗逆反应中起着重要的作用。本文首次从中间锦鸡儿中
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通过转录因子调控功能基因的表达是植物抗逆应答反应的关键环节。MYB转录因子是植物体内最大的转录因子家族之一,它在植物抗逆反应中起着重要的作用。本文首次从中间锦鸡儿中克隆到MYB68基因并对其进行表达分析,具体结果如下：1.运用RT-PCR及RACE技术从中间锦鸡儿中克隆到MYB68基因的全长cDNA序列1,209bp(命名为CiMYB68),具有852bp的完整开放阅读框(ORF); gDNA的长度也为1209bp,无内含子。生物信息学分析显示：CiMYB68蛋白由284个氨基酸组成,是亲水蛋白,分子量为31,459.4Da,理论等电点为8.95。2.利用实时荧光定量RT-PCR检测中间锦鸡儿幼苗在不同胁迫处理下CiMYB68基因的转录水平,发现在干旱和低温的处理下CiMYB68的表达量显著增加。3.克隆得到了CiMYB68的启动子区域,长1,458bp,具有基本的启动子转录元件和响应生物和非生物胁迫的顺式作用元件。4.将CiMYB68基因构建过表达载体后转化野生型拟南芥,已筛选到转基因纯合体株系。5.构建了CiMYB68基因和GFP融合的表达载体,并转化拟南芥野生型植株和原生质体,通过激光共聚焦显微镜观察确定CiMYB68定位在细胞核中。
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