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目的:研究B、C基因型乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白对多药耐药基因1(Multidrug resisitance gene 1,MDR1)反式激活能力的差别。方法: PCR扩增B、C基因型HBV X基因并克隆于pcDNA3.1/HisC载体(重组载体分别为pcDNA3.1/HisC-XB及pcDNA3.1/HisC-XC)。以FuGENE6将重组表达载体转染HepG2细胞,采用融合表达的X-press多肽表位抗体,通过western blot检测目的蛋白在不同时间段的表达。PCR扩增MDR1基因启动子并克隆于萤火虫荧光素酶报告载体pGL3-Basi(c重组载体为pGL-MDR)。pGL-MDR分别与pcDNA3.1/HisC-XB或pcDNA3.1/HisC-XC共转染HepG2细胞,转染后48小时裂解细胞并检测胞内萤火虫荧光素酶活性,实验数据以SPSS 11.5软件分析。结果: 1、成功克隆X蛋白表达载体及MDR1报告载体。Western blot显示pcDNA3.1/HisC-XB或pcDNA3.1/HisC-XC在HepG2细胞中均能表达HBV X蛋白,以转染后48小时为最高;2、当pGL-MDR报告质粒与X基因重组载体或空载体质量比在1:2～1:4范围内,萤火虫荧光素酶在各转染细胞内的活性依次为pcDNA3.1/HisC-XB+pGL-MDR组>pcDNA3.1/HisC-XC+pGL-MDR组>pcDNA3.1/HisC+pGL-MDR组(对照组),且存在剂量-效应关系。结论: B、C基因型HBV X蛋白对多药耐药基因均有反式激活能力,且B基因型强于C基因型。