【摘 要】
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作为一种世界性分布的死体营养型植物病原真菌,核盘菌[Sclerotinia sclerotiorum(Lib.)de Bary]是最难防治的农业植物病原真菌之一,严重影响油菜、花生、向日葵等作物的生产。目前防治菌核病主要以多菌灵和菌核净等化学药剂为主。菌核净作为防治油菜菌核病的主要药剂,本论文研究了菌核净预处理对核盘菌菌丝生长和致病力的影响,并初步探究了菌核净预处理对核盘菌致病力刺激作用的机制。主
【基金项目】
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国家自然科学基金“菌核净对核盘菌低剂量刺激作用及分子机理的研究”(31972301);
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作为一种世界性分布的死体营养型植物病原真菌,核盘菌[Sclerotinia sclerotiorum(Lib.)de Bary]是最难防治的农业植物病原真菌之一,严重影响油菜、花生、向日葵等作物的生产。目前防治菌核病主要以多菌灵和菌核净等化学药剂为主。菌核净作为防治油菜菌核病的主要药剂,本论文研究了菌核净预处理对核盘菌菌丝生长和致病力的影响,并初步探究了菌核净预处理对核盘菌致病力刺激作用的机制。主要研究结果如下:在含不同浓度菌核净的马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)上对核盘菌进行预处理,低剂量的菌核净能够刺激核盘菌的生长,菌核净浓度为0.00005~0.005μg/m L对3株敏感菌株生长的平均最大刺激率为10.96±0.27%(SD),菌核净浓度为0.1~20μg/m L对3株菌核净抗性菌株生长的平均最大刺激率为12.14±1.17%(SD)。将经过菌核净预处理生长受到刺激的菌丝转接到不含药的PDA上,与未经过预处理的对照相比,对6株核盘菌的生长的平均最大刺激率为10.48±0.86%(SD)。将经过菌核净预处理的菌丝转接到未喷施杀菌剂的油菜叶片上,对6株核盘菌致病力的平均最大刺激率为16.30±2.19%(SD)。将经过菌核净预处理生长受到刺激的菌丝转接到含有高剂量(有效中浓度EC50的剂量)菌核净的PDA上,与未经过预处理的对照相比,对菌核净敏感菌株HLJMG1W、GS1W和GS2W生长的最大刺激率分别为10.51%、12.40%和9.67%,对菌核净抗性菌株HLJ4W、HLJ5W和HLJ6W生长的最大刺激率分别为12.01%、17.52%和9.91%。将经过菌核净预处理生长受到刺激的菌丝转接到喷施高剂量菌核净(保护作用在50%左右的剂量)的盆栽油菜叶片上,对敏感菌株HLJMG1W、GS1W和GS2W致病力的最大刺激率分别为20.95%、20.05%和22.04%,对抗性菌株HLJ4W、HLJ5W和HLJ6W致病力的最大刺激率分别为15.14%、16.40%和17.66%。将经过菌核净预处理生长受到刺激的菌丝转接到含有高剂量异菌脲(与菌核净作用机制相同)的PDA上,与未经过预处理的对照相比,对菌株HLJMG1W、GS1W、HLJ5W和HLJ6W生长的最大刺激率分别为10.83%、10.00%、10.32%和10.55%,但预处理的菌丝转接到含高剂量多菌灵和啶酰菌胺(与菌核净作用机制不同)的PDA上,与对照相比生长均没有显著性差异(P>0.05)。将经过菌核净预处理生长受到刺激的菌丝转接到喷施高剂量异菌脲的盆栽油菜叶片上,对菌株HLJMG1W、GS1W、HLJ5W和HLJ6W致病力的最大刺激率分别为18.28%、18.26%、18.35%和15.27%,但预处理的菌丝转接到喷施高剂量多菌灵和啶酰菌胺的油菜叶片上,与对照相比致病力均没有显著性差异(P>0.05)。低剂量的菌核净预处理能够降低菌核净在盆栽油菜叶片上对菌核病的防治效果。菌株HLJMG1W在含低剂量菌核净的PDA上生长的菌丝转接到喷施20和40μg/m L菌核净的盆栽油菜叶片上,与未经过菌核净预处理相比,对菌核病的保护作用防效从63.36%和79.30%分别下降到55.03%(P=0.039)和70.79%(P=0.046),治疗作用防效从51.80%和67.68%分别下降到41.13%(P=0.026)和57.80%(P=0.045)。低剂量的菌核净预处理同样能够降低异菌脲在盆栽油菜叶片上对菌核病的防治效果,但对多菌灵和啶酰菌胺防治效果没有显著性影响(P>0.05)。菌核净预处理对核盘菌刺激作用机理的研究表明:菌核净预处理对核盘菌NADPH氧化酶(P=0.6)、角质酶(P=0.75)和木聚糖酶活性(P=0.93)没有显著影响;菌核净预处理对核盘菌致病的刺激作用与致病相关基因NADPH氧化酶基因Ss NOX1和Ss NOX2、木聚糖酶基因Ss XYL1、γ-谷氨酰转肽酶基因Ss Ggt1、叉头框(forkhead box,FOX)转录因子Ss Fkh1的表达无关(P>0.05)。综上所述,低剂量的菌核净预处理能够刺激核盘菌在无药的PDA上、含高剂量菌核净和异菌脲的PDA上菌丝的生长,能够刺激核盘菌在未喷施药剂的油菜上、喷施高剂量菌核净和异菌脲的油菜叶片上的致病力,并且低剂量的菌核净预处理能够降低菌核净和异菌脲在盆栽油菜叶片上对菌核病的防治效果。这些研究对深入理解杀菌剂预处理对植物病原菌刺激作用的特点和刺激作用的机理具有重要的意义,对科学、合理地利用菌核净防治核盘菌具有重要的指导作用。
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