桃红叶病病原研究

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桃树红叶病具有叶片季节性红化等综合症状,80年代以来广泛发生?局部地区病害严重,曾报道病原可能类似番茄斑萎病毒(TSWV).96-97年对郑州、北京地区9个桃园的调查发现症状严重程度比以前明显降低.95-97年对典型症状树取叶样重复以前报道方法进行提纯,未见类似TSWV粒子,但发现直径23nm小球形粒子和长条形粒子.用嫁接和机械接种方法在千日红、矮牵牛上分离到一种长条形病毒分离物P-1,初步鉴定为TMV株系;已制备出高效价抗血清并应用于田间检测;P-1分离物回接毛桃实生苗后,在上部叶片出现田间常可见到的脉间失绿症状,ELISA检测为阳性.肯定了TMV对档的侵染及致病作用.李坏死环斑病毒(PNRSV)的地高辛标记的cRNA探针与桃红叶病样品总核酸杂交,检测到特异性杂交点,证实了PRNSV侵染.血清学方法在桃红叶样品中未检测到ArMV和ToRSV.典型症状树中提取到3-4条病毒特有dsRNA谱带,其中6.2kb带与P-1和TMV谱带在同一位置,与ArMV没有共同谱带.RT-PCR方法未扩增出ToRSV特异性谱带,肯定了桃红叶样品中不存在ArMV和ToRSV.另外2-3条dsRNA谱带尚未能作出判断.往返电泳未检测出类病毒的特征性谱带.肯定了桃红叶样品中不存在类病毒.桃红叶病样品DAPI染色法检测到特异性荧光,电镜观察到植株,PCR和Nested-PCR扩增出特性谱带肯定了红叶病株中存在植原体.以上结果表明桃红叶病可能是多种病毒和植原体复合侵染所致.还需进一步研究未知的和已检测出的病原,以确定红叶病的主要致病病原.
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