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目的：研究新型光敏剂钌(Ⅱ)多吡啶配合物Ru1、Ru2和Ru3对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA)的光动力(Photodynamic therapy，PDT)抗菌作用，为探索PDT抗多重耐药菌提供实验依据。
方法：
(1)用PBS配制不同浓度(5μM、10μM、15μM、20μM和25μM)的三种光敏剂溶液，分别测定不同浓度的三种光敏剂的吸收光谱，根据吸收光谱选定三种光敏剂的PDT治疗激发光波长。
(2)三种光敏剂对MRSA的PDT抗菌作用的研究。实验分PDT组、单纯光敏剂组、单纯光照组和空白对照组。PDT组：不同浓度的光敏剂与菌液(光敏剂终浓度为50μM、25μM、10μM、2.5μM、0.25μM、0.025μM，细菌终浓度为108CFU/mL)孵育30min后，以激发波长532nm激光照射Ru1、4.57nm激光照射Ru2和Ru3，照射时间10min(功率密度40mW/cm2)。单纯光敏剂组：光敏剂与菌液浓度同PDT组，孵育30min，不予照光。单纯光照组：菌液浓度同PDT组，不予光敏剂孵育，激光照射剂量同PDT组。空白对照组：菌液浓度同PDT组，不予光敏剂，不予照光。处理后30min内以稀释平板法测定细菌存活浓度，通过与空白对照组比较，分析PDT组各浓度点的抗菌效果，并对三种光敏剂的PDT抗菌效率进行比较。
(3)PDT抗菌作用位点的初步研究：选择浓度为2.5μM的光敏剂Ru3对MRSA进行PDT处理(激光照射参数同前)，分别在处理后即刻、10min、30min用3％戊二醛将菌液固定，以磷钨酸进行负染色后，在透射电镜下观察细菌形态学改变。以2.5μM的Ru3为光敏剂，对对数生长期的MRSA菌液进行PDT处理(激光照射参数同前)后，提取基因组DNA进行琼脂糖凝胶电泳。
结果：
(1)三种光敏剂的最大吸收峰均在紫外波段。在可见光区Ru1的吸收峰在490nm和560nm，Ru2的吸收峰在405nm和465nm，Ru3的吸收峰在410nm和435nm，根据三种光敏剂在457nm和532nm波长处的摩尔消光系数的比较，Ru1选用532nm为激发波长，Ru2和Ru3则以457nm为激发波长。
(2)单纯457nm或532nm激光照射均不影响细菌的活性，三种光敏剂的单纯光敏剂组对细菌活性也无影响。Ru2和Ru3的PDT抗菌作用较Ru1强，前两种光敏剂浓度为2.5μM时即能达到有效杀菌(使细菌存活浓度降低3Log10以上)，而Ru1在浓度为10μM时才能达到有效杀菌。
(3)电镜观察发现细菌膜结构(包括细胞壁和细胞膜)破坏严重，形成碎片，细胞内容物外溢，染色体暴露。PDT处理后随着时间延长，各视野内膜结构仍然完整的细菌数量递减。电泳结果显示PDT组DNA电泳条带变淡。
结论：
(1)三种钌(Ⅱ)多吡啶配合物光敏剂介导的PDT作用能有效杀伤MRSA，其抗菌作用Ru3≈Ru2>Ru1。
(2)细菌的膜结构可能是光敏剂钌(Ⅱ)多吡啶配合物介导的PDT作用的主要位点。