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研究背景肝纤维化（hepatic fibrosis, HF）是一种可逆的瘢痕形成反应，几乎发生于所有的慢性肝损伤患者,全球具有较高的发病率和病死率。HF是一种以肝星状细胞（hepatic stellate cells, HSCs）的活化和细胞外基质（extracellular matrix, ECM）的过度沉积为主要特征的病理过程。近年来有研究表明，肝纤维化是可逆转的过程[2-5]，但目前尚无明确的诊断肝纤维化的方法。胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1（insulin-1ike growth factor binding protein related protein1, IGFBPrP1）是近年来发现的一种可溶性蛋白，可调节细胞增殖、黏附及凋亡等多种生理、病理过程。导师刘立新前期研究发现IGFBPrP1是一种新的致肝纤维化因子。第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因（Phosphatase and Tensin HomologDeleted on Chromosome Ten, PTEN）作为目前发现的第一个具有蛋白磷酸酶活性和脂质磷酸酶活性双重磷酸酶活性的抑癌基因，主要通过其脂质磷酸酶活性发挥抑癌作用。有研究表明PTEN在肝纤维化过程中起着负性调节因子的作用。那么PTEN是否参与了IGFBPrP1所介导的大鼠肝纤维化的发生过程，目前尚无类似研究，因此设计了本课题。目的明确腺病毒携带的胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1所介导的大鼠肝纤维化中PTEN的表达及意义。方法32只清洁级雄性SD大鼠随机分为4组：正常组（8只）：尾静脉注射生理盐水，4x109pfu/只；阴性对照组（8只）：尾静脉注射Ad-EGFP，4x109pfu/只；Ad-IGFBPrP12w组（8只）：尾静脉注射Ad-IGFBPrP1，4x109pfu/只；Ad-IGFBPrP14w组（8只）：尾静脉注射Ad-IGFBPrP1，4x109pfu/只。分别于2周末、4周末行乙醚吸入麻醉后采集、分离肝组织，部分肝左叶浸入10％中性福尔马林中固定，剩余的肝左叶、肝右叶及肝脏其余部分分别包入铝箔纸内转入-80℃冰箱保存。行HE染色和苦味酸-天狼猩红特殊染色观察肝组织形态学变化及胶原纤维变化情况；免疫组织化学染色检测大鼠肝组织中IGFBPrP1、-平滑肌肌动蛋白（-SMA）、I型胶原(Collagen I)、PTEN的表达和分布。结果（1）HE染色结果：正常组肝细胞结构正常；阴性对照组肝小叶周边少数细胞发生变性，中央静脉周围细胞结构正常；Ad-IGFBPrP12w组大鼠肝组织中肝小叶周边出现大面积的肝细胞变性，细胞呈空泡状，有点状坏死及少量炎细胞浸润；Ad-IGFBPrP14w组大鼠肝细胞变性坏死程度进一步加重，伴有炎细胞的浸润，汇管区周边可见胶原纤维增生。（2）苦味酸-天狼猩红特殊染色结果：实验组大鼠肝组织中胶原纤维的含量较正常组和阴性对照组大鼠肝组织中明显增多。肝组织中胶原纤维含量在Ad-IGFBPrP12w组的大鼠肝组织较正常组和阴性对照组中明显增多（0．614％0.057％VS0.121％0.025％，P=0.02;0.614％0.057％VS0.178％0.034％,P=0.03），且Ad-IGFBPrP14w组的大鼠肝组织胶原纤维含量较Ad-IGFBPrP12w组的大鼠肝组织显著增多(1.122％0.117％VS0.614％0.057％, P=0.027)，差异均具有统计学意义。（3）免疫组织化学染色结果：在正常组和阴性对照组大鼠肝细胞中IGFBPrP1、-SMA、Collagen I表达不明显，而在Ad-IGFBPrP1组中大鼠肝细胞中表达显著增强。其中Ad-IGFBPrP14w组的大鼠肝组织中的表达强于Ad-IGFBPrP12w组的大鼠（0.320.03,0.350.03,1.290.08,3.440.12,F=358.89, P＜0.01;0.280.03,0.330.03,1.060.07,2.580.18, F=117.17, P＜0.01;0.320.02,0.390.02,0.900.02,1.640.13, F=78.66, P＜0.01）。在正常组和阴性对照组的大鼠肝细胞中PTEN高表达，而在Ad-IGFBPrP1组大鼠肝细胞中表达明显弱于正常组和阴性对照组，其中Ad-IGFBPrP14w组大鼠肝组织中的表达弱于Ad-IGFBPrP12w组的大鼠。（20.90±1.56,19.36±1.50,5.10±0.33,1.52±0.18, F=80.33, P＜0.01）。（4）免疫组织化学染色相关性分析结果：肝组织中IGFBPrP1表达的变化与-SMA（r=0.909, P＜0.01）、Collagen I（r=0.964, P＜0.01）的表达变化情况呈正相关；肝组织中IGFBPrP1表达的变化与PTEN表达变化情况呈负相关（r=-0.809, P＜0.01）。结论（1）Ad-IGFBPrP1可导致大鼠肝组织发生纤维化样变化；（2）Ad-IGFBPrP1介导的大鼠肝纤维化过程中PTEN表达下调，可能在此过程中发挥着负性调节作用。