维药孜然不同提取物抗氧化及对α-葡萄糖苷酶抑制的研究

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孜然(Cuminum cyminum L.)在维药中果实入药,用以治疗消化不良和胃寒腹痛等。孜然果实主要含有挥发性和非挥发性两部分成分,在挥发性成分,烯烃类化合物较多,非挥发性成分主多要有酚类、黄酮类、糖类、脂类、蛋白类等化合物。黄酮及多酚类化合物具有广泛的生物活性,如抗氧化、抗菌、抗病毒、抗糖尿病等。本文采用溶剂提取法获得孜然总酚、总黄酮,并对孜然总酚提取工艺进行了优化;同时采用有机溶剂萃取法获得孜然果实不同提取部位,采用抗氧化相应评价方法(DPPH法、ABTS法、OH·法、铁氰化钾还原法)对孜然总酚、总黄酮及不同提取物抗氧化活性进行研究,同时利用酶法,对孜然总酚、总黄酮及不同提取物具有抑制α-葡萄糖苷酶性进行探讨。孜然总酚含量采用Folin-Ciocalteu比色法测定,孜然总黄酮含量应用硝酸铝显色法测定,孜然总酚含量测定采用响应面法进行工艺优化,初步纯化了孜然总酚和总黄酮。结果如下:(1)孜然总酚提取优化条件为:乙醇浓度70%、料液比1:20、超声温度60℃、超声时间60 min。在此工艺条件下,孜然总酚的含量为13.812 mg/g,高出预测值4.5%。大孔吸附树脂法对孜然总酚粗提物初步纯化,孜然总酚含量从12.044mg/m L上升至约20.186mg/m L,显示大孔树脂对孜然总酚具有一定的纯化效果。纯度从儿茶素当量34%上升至59%。孜然总黄酮含量为27.7+1.3μg/m L;醇溶性黄酮含量为25.3+0.9μg/m L;水溶性黄酮含量为13.5+0.3μg/m L。(2)抗氧化评价中DPPH自由基清除能力石油醚部位最强,依次为Vc>石油醚提取物>氯仿提取物>乙酸乙酯提取物>正丁醇提取物>乙醇提取物>纯化后总酚>孜然总酚>纯化后总黄酮>总黄酮;ABTS自由基清除能力(浓度范围1-25mg/m L)乙酸乙酯部位最强:依次为Vc>乙酸乙酯提取物>正丁醇提取物>纯化后总黄酮>纯化后总酚>氯仿提取物>石油醚提取物>孜然总酚>乙醇提取物>总黄酮;OH·自由基清除能力乙酸乙酯部位最强:依次为Vc>乙酸乙酯提取物>正丁醇提取物>石油醚提取物>纯化后总酚>乙醇提取物>孜然总酚>氯仿提取物>纯化后总黄酮>总黄酮;总还原力实验中,孜然各提取物总还原力(浓度范围1-25mg/m L)最强的为正丁醇部位。以上结果可为今后从孜然中分离出抗氧化活性物质一定的数据基础。(3)采用α-葡萄糖苷酶抑制实验,研究孜然不同提取物抗糖尿病活性,对α-葡萄糖苷酶的抑制活性,孜然总酚>阳性对照阿卡波糖>孜然乙醇提取物>孜然总黄酮>孜然氯仿提取物>孜然石油醚提取物>孜然乙酸乙酯提取物>孜然正丁醇提取物,孜然精油IC50值为72.41μL/m L。酶法实验结果显示,孜然不同提取物都具有一定的抑制α-葡萄糖苷酶活性,且孜然总酚对于α-葡萄糖苷酶抑制效果最强,可为孜然的降血糖活性的进一步研究提供数据参考。
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