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目的：大鼠创伤性深静脉血栓模型中,针对血栓形成前期及血栓形成高峰期、血栓形成高峰期不形成状态,检测大鼠静脉血管组织、血细胞中NOX4基因表达量。同时在临床深静脉形成前期及血栓高峰期形成、不形成状态下,检测血细胞中NOX4的表达情况。分析NOX4在深静脉血栓形成中的促栓作用,明确人血细胞转录层面NOX4作为深静脉血栓早期诊断的候选分子标志物。方法：1,大鼠DVT模型基因芯片数据归纳分析及血细胞real-time PCR检测①对建立的大鼠急性创伤性深静脉血栓模型,股静脉血管组织进行Affymetrix 230A基因芯片检测,并对芯片数据整理归纳,采用倍数变化分析筛选出差异表达基因(上调基因Log2 Ratio≥1,且Change标注为Ⅰ；下调基因：Log2Ratio≤-1,且Change注为D),并进行GO分类；②在NOX家族的基因数据中,通过调节相关参数,确定显著差异表达基因,参数设定为Single Log2 Ratio=3或Single Log2 Ratio=3,分析NOX4在深静脉血栓形成过程中的表达变化趋势；③通过BLAST与人进行同源性比对,明确与人类基因的同源性；④在建立的大鼠急性创伤性深静脉血栓模型中,根据观察时间和血栓形成情况将100只SD鼠分为正常对照组(A组)、血栓形成前期组(B组)、血栓形成高峰组(C组)和无血栓形成组(D组),提取各组血细胞总RNA并进行质量检测；⑤应用Oligo6.69引物设计软件对大鼠NOX4设计反转录引物,将各组大鼠总RNA反转录为cDNA,运用real-time PCR技术初步验证大鼠血液样本中NOX4的表达情况。2,临床DVT血液样本半定量PCR检测①制定临床血液样本采集标准,根据临床样本的观察时间和血栓形成情况进行如下分组：正常对照组(A1组)、创伤对照组(A2)、血栓形成组(B组)和无血栓形成组(C组),并提取各组血液总RNA并进行质量检测；②应用Oligo6.69引物设计软件对人NOX4设计反转录引物,将各组人血细胞总RNA反转录为cDNA,以GAPDH为内参照运用半定量PCR检测NOX4在临床血细胞样本中的表达情况；③对实验数据进行处理、分析,将NOX4在大鼠血管组织、血细胞中以及人血细胞中的表达变化作比较,结合其生理作用和参与其他疾病发生发展的机理,分析其在深静脉血栓形成中的地位和作用,确定人血转录层面能够作为早期诊断的候选分子标志物。结果：1,NOX4自创伤即刻到血栓形成高峰期静脉血管组织基因芯片检测结果中均出现显著上调(BvsA:1.186, CvsA:4.716, DvsA:6.443),在血液中的real-time PCR检测结果也呈现明显上调的趋势。推测该基因可能在DVT形成中发挥着重要作用,与血栓形成密切相关。2,大鼠NOX4基因与人NOX4基因具有高度同源性,临床血细胞中NOX4经半定量PCR检测,结果显示,在深静脉血栓形高峰期形成组及不形成组均有表达,但差异不明显,这可能与临床初步实验的样本数纳入不足及纳入的标准不完善有关。结论：1,大鼠DVT模型自创伤即刻到血栓形成高峰期静脉血管组织、血细胞中NOX4均出现显著上调,可能在深静脉血栓形成中发挥重要作用。2,NOX4在大鼠实验中深静脉血栓形成前的高表达作为人深静脉血栓形成早期诊断的候选分子标志物仍需进一步研究确定。临床实验部分,随着样本数不断扩大、纳入标准的完善及继续深入研究,NOX4在人DVT血细胞中的表达情况将可能出现与大鼠实验类似结果。