【摘 要】
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动物软骨组织中含有一种以蛋白聚糖形式存在的酸性粘多糖——硫酸软骨素,应用现代生物技术方法适当处理后,能获得优质的硫酸软骨素,同时获得良好的社会价值和经济效益。本论
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动物软骨组织中含有一种以蛋白聚糖形式存在的酸性粘多糖——硫酸软骨素,应用现代生物技术方法适当处理后,能获得优质的硫酸软骨素,同时获得良好的社会价值和经济效益。本论文主要利用碱提取技术,以加工废弃的鳄鱼软骨为原料,通过选择合适的提取工艺流程,研究开发鳄鱼硫酸软骨素产品。通过研究碱提取过程中影响得率的单因素,并结合响应面分析得到最优提取条件为:NaOH浓度5%,固液比1:14 g/mL,温度40℃、时间209.82 min。采用离子交换色谱法对粗提物进一步纯化,根据峰形确定得到单一物质;通过化学组成测定,可知鳄鱼硫酸软骨素中D-葡萄糖醛酸含量、氨基己糖含量和硫酸基含量分别为26.05%±0.01、49.93%±0.01和26.03%±0.01、;紫外光谱表明纯化后的样品不含蛋白和核酸;采用高效液相色谱分析,纯化后的样品与市面上的硫酸软骨素保留时间相近,近似确定所得的样品即为硫酸软骨素;红外光谱结果表明纯化后的样品中只存在α-吡喃糖苷键;核磁共振图谱结果表明纯化后的样品含有硫酸软骨素特征性基团。细胞学毒理实验检测结果表明,鳄鱼硫酸软骨素并未影响LO2细胞的生长,甚至能起到促进其生长的效果;体外免疫调节作用结果表明,鳄鱼硫酸软骨素能促进B淋巴细胞和T淋巴细胞的增殖;对其体外抗氧化活性进行检测,结果表明鳄鱼硫酸软骨素具有抗氧化能力;用ICR小鼠构建抗疲劳模型,评估其体内抗疲劳功效,同时采用血清学检测手段,对血清进行检测。本文将多种生物学方法相结合,在分子、细胞和个体水平上,从多个方面深入而细致地对鳄鱼硫酸软骨素的生物学活性进行评估,把鳄鱼软骨这种加工业副产品变废为宝,用于功能食品,以改善人们的健康状态提高人们的生活质量奠定了理论基础,还可以减少环境污染,从而提高鳄鱼产品开发的附加值,对鳄鱼资源的充分利用具有一定的意义。
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