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木霉是土壤微生物区系的重要组成部分,在土壤中增加其含量能够防治多种植物病害,是应用非常广泛的生物防治菌。分析木霉的遗传以及功能多样性,能够为开发多功能木霉资源,拓展木霉的应用空间,有效地利用木霉防治植物病原菌,提供理论基础,并可能发现能够应用于多功能菌剂开发的木霉菌株。1.对60株木霉进行解磷、解钾、拮抗、促生及降解农药能力的测定。固体平板试验结果显示,难溶性磷和含有毒死蜱的固体平板上没有发现水解圈,但是在难溶性钾平板上发现了水解圈;对峙培养发现对灰霉有一定的拮抗作用的木霉有26株,其中拮抗作用较好的有12株。液体试验结果显示,5株木霉具有较高的解磷能力,其中T-404解磷效果最好,为109.22 mg/L。没有发现解钾能力高的木霉菌株。木霉对毒死蜱的降解作用很差,但可以耐受高浓度的毒死蜱。通过木霉对辣椒促生试验发现,不同的木霉对辣椒的发芽有促进和抑制作用;木霉T-450的发酵原液和稀释50倍时对发芽具有促生作用;盆栽试验发现木霉T-400对辣椒的生长具有促进作用。综合以上5种功能的测定结果,筛选出T-400、T-403、T-404、T-440、T-450共5株木霉。2.通过形态学、ITS和18S rDNA对5株优势木霉菌株进行鉴定。结果显示,T-403、T-404、T-440为T.koningiopsis T-400、T-450为T.koningii。与 18SrDNA 序列相比,ITS序列更适用于木霉的菌种鉴定。3.针对转化过程中4个关键因素对农杆菌介导康氏木霉转化效率的影响建立了较为高效的康氏木霉转化体系:IM培养基中AS浓度为200 μM,诱导时间6 h,农杆菌菌液浓缩达到2倍达到(OD600=0.40～0.58)与107个/mL的木霉孢子等体积混合,400μL混合液涂布在含200μM AS、铺有滤纸的共培养基上26℃共培养48 h。在该转化条件下EHA105转化康氏木霉的效率为65～130个转化子/107个木霉孢子。利用该转化系统成功获得了 200多个突变体;经鉴定,随机挑选的转化子遗传稳定性高。4.对转化子进行解磷能力测定发现,不同的转化子解磷能力不同,与野生型T-400的可溶磷含量为70.04 mg/L相比,转化子解磷能力最高的为T-87,为123.68 mg/L,提高了 76.57%。