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目的:使民族药物和现代科技相结合,从多层面多角度探索云南彝药恒古骨伤愈合剂治疗激素相关性股骨头坏死的作用机理。 方法:1、结合文献报告和我们大量预实验的结果,采用小剂量LPS(10μg/kg体重,间隔24h)两次静注加MPS(20mg/kg体重,间隔24h)三次肌注的方法制作了兔SANFH的动物模型,检测了该模型血浆CHOL、TG,HDL的量,用光镜、透射电镜和扫描电镜观察股骨头组织学和超微结构的变化,并与仅肌注PS制作的兔SANFH模型进行了比较。2、在此基础上,比较了用云南彝药恒古骨伤愈合剂治疗后,两种SANFH兔模型的血脂、光镜、透射电镜的变化特点。3、此后再用小剂量LPS加MPS的模型进行恒古骨伤愈合剂治疗后的深入研究:随机抽取4只造模第4周的兔经MRI和组织学检查证实均有股骨头坏死后,再以查随机数字表法将兔分为4组:A组(空白对照组),B组(正常兔服用恒古骨伤愈合剂),C组(造模后不喂恒古骨伤愈合剂),D组(造模后喂恒古骨伤愈合剂),每组24只。B组和D组用恒古骨伤愈合剂,A组和C组用等量生理盐水,按计算出的药量灌胃,1次/2d。于造模第4周先抽血查血脂后取4只兔,给药第4、8、12周各取8只兔先抽血查血脂后处死,取双侧兔股骨头,冠状面剖开,行大体观察后,分别留存兔股骨头标本行光镜、透射和扫描电镜观察并对结果进行比较。4、对每一只兔的股骨头同时行免疫组化、原位杂交并直接提出股骨头内总RNA进行实时荧光定量PCR。在此过程中,用我们建立的方法仅需约4h即可从兔股骨头中高效快速提取出总RNA,同时我们成功设计了兔相关的探针和引物,定性和定量研究了不同时相点兔股骨头内VEGF、cbfa1和BMP-2基因表达的动态变化特点。 结果:1、小剂量LPS(10μg/kg体重)间隔24h两次静注加MPS三次肌注的方法制作的兔SANFH动物模型(C组),在造模第4周末血浆CHOL和TG较A组均升高,HDL的量降低,差别有统计学意义(p<0.05);而在造模第8周、第12周末血浆CHOL、TG、HDL的量与A组相近,差别无统计学意义(p>0.05):