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禽流感病毒的自然宿主是水禽,通常仅能感染鸡、火鸡、鸭、鹅、野鸟和水禽等宿主,具有种属特异性,很难突破宿主屏障感染哺乳动物和人类。然而,近几年越来越多的事件表明,低致病性禽流感病毒能够跨越种间屏障,感染人和哺乳动物,对人类的安全构成威胁。因此,像H6和H9亚型的低致病性禽流感病毒越来越引起人们的关注。本文实验内容及结果,为研究低致病性禽流感病毒跨越种间屏障,对哺乳动物致病,以及在哺乳动物间传播的分子机制奠定了基础。本文应用豚鼠模型,评价一株H6N1亚型禽流感病毒的接触传播能力。A/mallard/Sanjiang/275/2007既能结合SAa-2,3Gal受体,又能结合SAa-2,6Gal受体；M-275能够在豚鼠的上呼吸道复制,在鼻甲骨的复制能力最强,平均滴度为1.5LogEID50/mL～2.5LogEID5o/mL,豚鼠的肝脏、脾脏、脑、肠道、肺脏和肾脏都未检测到病毒；M-275能够引起豚鼠肺脏发生病变,但豚鼠在14d观察期内未表现任何临床症状；此株禽流感病毒M-275不能在豚鼠间接触传播。M-275在豚鼠体内连续性传代,传播至第七代和第十八代后,病毒仍不能够在豚鼠间传播；传至第十八代得到的病毒M-275-P18-M2对小鼠的致病力明显增强,MLD50为105.25EID50,106EID50的攻毒量对小鼠的致死率是100%,原代毒株对小鼠不致死；根据对传代病毒M-275-P2-E1、M-275-P7-M1、M-275-P16-M1和M-275-P18-M2的全基因测序结果得出,PB2D701N、PB1Q687R、HA G122E、NA W233C、M1D94N、M1Q211R这六个突变位点可能都与病毒在哺乳动物间传播能力的增强无关；而PB2D701N位点的突变,可能是M-275-P18-M2对小鼠致病力增强的原因。本文还将一株H9N2亚型AIV在小鼠的肺脏进行传代,得到鼠肺适应株JN-P9-2-Ml; JN-P9-2-M1对小鼠的致病性明显提高,其MLD50为103.5EID50、106EID50、105EID50、104EID50的攻毒剂量的小鼠幸存率是0,比原毒提高了至少1000倍,原毒对小鼠不致死；JN-P9-2-M1在豚鼠间的传播能力也有了一定的提高,可以偶然在豚鼠间接触传播,原毒JN不能在豚鼠间传播；根据对传代病毒JN-P5-2-M1和JN-P9-2-M1的全基因测序结果,PB2E627K、HA N313D和HA N496S三个位点可能是病毒对小鼠致病力初步提高的原因,而PA L342I和NA N218T这两个点突变,就有可能是进一步提高病毒对小鼠致病力的关键位点。成功构建H9N2强毒株JN-P9-2-M1的反向遗传操作平台,拯救病毒rJN-P9-2-M1的生物学特性同亲本毒株JN-P9-2-M1一致。利用该平台,可以进一步筛选导致JN-P9-2-M1对小鼠表现为高致病性的关键位点,为进一步研究H9N2亚型禽流感病毒致病性变异的分子机制提高了条件。