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目的 自从十九世纪巴斯德发现大蒜具有一定的抗菌活性后,这方面的研究引起了许多学者的兴趣,大蒜被誉为“植物性天然广谱抗生素”。现代医学证实,大蒜具有抗菌、消炎、杀虫、抗癌、降血脂、预防动脉粥样硬化,提高机体免疫功能等作用。 幽门螺杆菌(H.pylori)感染和多种胃肠道疾病的发生密切相关,世界卫生组织已经把Hp列为Ⅰ类致癌因子,并明确为胃癌的危险因子。根据临床指征,对Hp进行根除治疗是目前医学界的共识,合理的选择药物对取得理想的根除率至关重要。目前根除H.pylori治疗的常用方案由一种质子泵抑制剂(PPI)或一种铋剂加上克拉霉素、阿莫西林、甲硝唑三种抗生素中的两种组成三联疗法。甲硝唑是方案中的重要组成部分,且价格低廉。但Hp对甲硝唑的耐药问题日益突出,并且大量、联合的Hp根治方案还使疗程延长、毒副作用增加、医药费用甚高、患者依从性差。因此寻找高效、低毒、廉价的抗Hp药物,特别是挖掘祖国医学宝库开发新型抗Hp药物的研究引人注目。大蒜素作为一种天然药物,可望为幽门螺杆菌感染治疗开辟一条新的途径。 近年来,大蒜作为一种天然药物,其抑制Hp感染的作用为国内外学者所认识,大蒜中所含抗Hp的有效成分统称为大蒜素,包括大蒜素(Allicin)、大蒜新素(Allitridi)和蒜制菌素(Allistatin),但是由于提纯方法、药物剂型及名称的不同导致大蒜中各种有效成分抗Hp研究的结论存在差异。对于各种有效成分抑制Hp的浓度范围也缺乏统一的规范。 H.pylori致病相关基因包括细胞毒素相关基因(cagA)、空泡毒素基因(vacA)等,研究发现Hp菌株存在致病相关基因的变异。流行病学调查发现,不同基因亚型的H.pylori感染具有明显的地域性分布差异,但目前,不同基因亚型的H.pylori菌株对大蒜素的敏感性是否存在差异则尚未见明确报道。本研究拟采用琼脂稀释法对H.pylori分离株进行大蒜素(Allitridi)及甲硝唑体外药敏试验,观察幽门螺杆菌对大蒜素的敏感性;比较大蒜素及甲硝哇对幽门螺杆菌的抑菌作用,观察二者共同作用对Hp的抑菌效果;探讨不同基因亚型H.Pyfori菌株对大蒜素及甲硝哩敏感性的差异,以期为临床H.pxlori的根除治疗提供有价值的参考。材料与方法 51株H.Pyfori菌株取自辽宁庄河及沈阳地区胃癌普查人群新鲜胃粘膜,其中庄河22例,沈阳29例。经分离、培养并鉴定,一0℃冻存。用标准的酚一氯仿方法提取菌种DNA后经聚合酶链反应及琼脂糖凝胶电泳对ca-幼、vacA(51、mlb、rn2)基因亚型进行检测。用琼脂稀释法进行药敏试验。结果经SPSS n .5软件包统计分析。实验结果 1、大蒜素对51株H.Pylori菌株表现出良好的抑菌效果,总抑菌率达92.16%(47/51),其MICso值为7.97卜群IYil,MIC值范围在1.25一40林岁Inl。并且其抗菌作用随着大蒜素浓度的增高而加强。 2、51株H.Pyfori菌株中有4株为甲硝哇耐药株(Mlc>256林扩血),大蒜素也未能将其抑制,但甲硝哇与大蒜素配伍使用后4株耐药株均被抑制。联合抑菌浓度大蒜素40林g/而,甲硝哇64卜扩血。 3、不同cag灯 vacA基因亚型的H.pylori菌株对大蒜素及甲硝哇敏感性的关系经概率单位(Probit)分析发现:vacAmlb+基因亚型的H.pylori菌株较vacAmlb一基因亚型的H.py10ri菌株对大蒜素及甲硝哇敏感;vacAmZ+基因亚型的H.Pyfori菌株较vacAmZ一基因亚型的H.Pyfori菌株对大蒜素敏感;c鳍A+八acAsl+mlb+基因亚型组合的H.nylori菌株较cagA+八,cAsl olb一H.p贝ori菌株对大蒜素及甲硝哇敏感。结论1.单独应用大蒜素对H.Pyfori菌株有良好的抑菌效果,Mlc值范围在1.25一40林岁nil。并且其抗菌作用随着大蒜素浓度的增高而加强。2.大蒜素与甲硝哇配伍使用能提高甲硝哇抗H.Pylori的敏感性。 3.不同c铭A/vacA基因亚型的H.Pyfori菌株对大蒜素的敏感性不同:vacAmlb+基因亚型的H.p贝ori菌株较vacAmlb一基因亚型的H.p贝ori菌株对大蒜素敏感;vacArnZ+基因亚型的H.Pyfori菌株较vacAmZ一基因亚型的H.p贝ori菌株对大蒜素敏感;c铭A+八acAsl+mlb+基因亚型组合的H.Pyl亩菌株较cagA+八acAsl一mlb一H.pvlori菌株对大蒜素敏感。建议临床采取“因型施治”的原则,对于感染毒力强的vacAmlb+、vacAznZ+及e昭A+八acA 51+mlb+Hp菌株的患者,临床医生应给予足够重视,又因其对大蒜素较为敏感,建议尽早采取Hp根治,可单独使用大蒜素进行根除治疗,以预防严重胃疾病的发生。