大丽轮枝菌引起的棉花黄萎病是棉花上危害最严重的病害之一,该病害在我国棉花产区广泛发生,其主要致病菌株为大丽轮枝菌落叶型株系。已有研究表明,大丽轮枝菌产生的N-乙酰乙醇胺类（NAEs）化合物NAE 12:0是引起棉花落叶的直接原因。本实验室前期研究发现,新种棉帚霉菌作为一个机会病原菌,与大丽轮枝菌共接种可增加病害严重度,并促进落叶,但致病机制尚不清楚。因此,本文通过分析棉帚霉菌代谢物,明确棉帚霉菌是否产生NAEs;在此基础上,通过基因敲除方法,明确NAE代谢物的功能作用。研究的内容和结果主要如下:1、棉帚霉菌次生代谢物的分析通过不同的提取方法,分别分析了棉帚霉菌的NAEs、脂肽以及疏水和亲水化合物。经UPLC-Triple-TOF/MS系统分析乙腈提取的NAEs表明,棉帚霉菌产生4种NAEs,即NAE 12:0、NAE 18:0、NAE 16:0和NAE 18:2。相似地,甲醇和氯仿提取的脂肽化合物质谱分析结果显示,棉帚霉菌产生hymeglusin、9,10-二羟基硬脂酸和3个新的环羧酚酸肽化合物,即帚霉素1、帚霉素2和帚霉素3。乙酸乙酯提取的疏水化合物的分析表明,棉帚霉菌产生Hymeglusin和3个糖脂化合物（O~4-β-D-吡喃半乳糖基-D-葡萄糖酸十五烷基胺、O~4-β-D-吡喃半乳糖基-D-葡萄糖酸十七烷基胺和O~4-β-D-吡喃半乳糖基-D-葡萄糖酸十九基胺）,其中O~4-β-D-吡喃半乳糖基-D-葡萄糖酸十七烷基胺和O~4-β-D-吡喃半乳糖基-D-葡萄糖酸十九基胺是新发现的化合物。甲醇提取的亲水化合物的质谱分析结果显示,棉帚霉菌产生5个化合物,包括fusaridioic acid A、14-O-Methyl-12-epi-1233B、（8E,12Z）-10,11-二羟基十八烷基-8,12-二烯酸、1’-脱氧脱落酸和hymeglusin。2、NAE代谢物功能作用的分析根据组装的棉帚霉菌基因组和注释的基因,设计了PCR扩增引物,构建基因敲除置换载体,并通过原生质体转化,分别获得N-乙酰磷脂酰乙醇胺水解磷脂酶D（NAPE-PLD）基因敲除突变子、脂肪酸酰胺水解酶（FAAH）基因敲除突变子和两个基因共敲除突变子。突变子发酵液的UPLC-MS/MS结果分析表明,NAPE-PLD酶基因敲除、FAAH酶基因敲除或双基因敲除均不能中断NAEs产生,这说明NAEs产生可能还存在其它途径。q RT-PCR分析显示,敲除NAPE-PLD酶基因使FAAH酶基因表达降低,表明两基因的转录存在关联性。突变子的致病性试验结果表明,共接种大丽轮枝菌086和FAAH酶基因突变子（086+ΔF01）,能够引起最大的病情指数（74.4）和落叶率（78.3%）,显著高于共接种086+ΔN01和086+ΔDK01。总之,本研究为进一步揭示真菌NAEs代谢途径以及研究病原菌协同致病机制提供了新线索。