【摘 要】
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该文以角豆胶为唯一碳源,从四川魔芋地的土样中筛选得到了一株高产β-甘露聚糖酶的细菌,通过形态观察和生理生化实验初步鉴定为芽孢杆菌属,命名为:MSJ-5.初步优化了该菌的产
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该文以角豆胶为唯一碳源,从四川魔芋地的土样中筛选得到了一株高产β-甘露聚糖酶的细菌,通过形态观察和生理生化实验初步鉴定为芽孢杆菌属,命名为:MSJ-5.初步优化了该菌的产酶配方为:3.5﹪魔芋粉,1.0﹪蛋白胨,0.5﹪酵母膏,起始pH为8.5.培养温度为32℃,220rpm,培养32小时即达产酶最高峰,酶活为,642U/ml.发酵液离心去菌体,上清液经硫酸铵沉淀,重溶透析,超滤收缩,上Sephadex G-100柱层析,以及DEAE-Sepharose离子交换柱等步骤,得到了SDS-凝胶电泳纯的甘露聚糖酶.用SDS-凝胶电泳测得分子量为38.1KD,用凝胶等电聚焦电泳测得等电点为4.8,酶的最适反应温度为50℃,最适pH为7.0,在pH5.0-7.0比较稳定.2mmol/l的EDTA使酶活剩余为原来的40﹪,EDTA量增大,酶活不再降低.电泳纯的酶水解0.5﹪角豆胶的产物经薄板层析,产生寡糖,不产生单糖,初步定性为内切β-甘露聚糖酶.SDS-聚丙烯酰胺电泳表明,该内切甘露聚糖酶在MSJ-5的胞外分泌蛋白中含量非常高.
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