低浓度过氧化氢对心肌细胞自噬的影响及其机理研究

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目的:1、低浓度过氧化氢对心肌细胞自噬的影响。2、低浓度过氧化氢对心肌细胞自噬相关蛋白Beclin1的影响。3、抗氧化剂对压力超负荷早期大鼠心脏心肌细胞自噬的影响。方法:分组:1、H9C2心肌细胞培养模型:(1)正常对照组(2)10u M过氧化氢干预组2、大鼠压力超负荷模型:(1)假手术组(sham)(2)腹主动脉缩窄(AAC)组(3)AAC+N-乙酰半胱胺酸(NAC)组采用Western Blot蛋白印迹法检测心肌细胞蛋白量的表达。结果:离体实验:H9C2心肌细胞培养模型中,低浓度H2O2(10umol/L)干预,72h对照组(1.00±0.10)VS 10umol/L组(0.76±0.12),组间比较,P<0.05,显示LC3II/I值在10umol/L H2O2干预72h时与对照组相比,表达明显下降;低浓度H2O2(10umol/L)干预,48h对照组(1.00±0.11)VS 10umol/L组(0.76±0.08),组间比较,P<0.05,显示Beclin1在10umol/L H2O2干预48h时与对照组相比,表达明显下降。在体实验:大鼠压力超负荷模型中,AAC术后3天,全心重量和左心室重量有增加的趋势,抗氧化剂NAC减轻心脏重量的增加。蛋白免疫印迹方法中,sham组(1.00±0.10)VS AAC组(0.61±0.12),组间比较,P<0.05,显示LC3II/I在AAC组与sham组比较,表达明显下降,具有统计学意义;AAC组(0.61±0.12)VS AAC+NAC组(1.01±0.10),组间比较,P<0.05,显示LC3II/I在AAC+NAC组与AAC组比较,表达明显上升,具有统计学意义。sham组(1.00±0.08)VS AAC组(0.81±0.06),组间比较,P<0.05,显示Beclin1在AAC组与sham组比较,表达显著降低,具有统计学意义;AAC组(0.81±0.06)VS AAC+NAC组(1.01±0.08),组间比较,P<0.05,显示Beclin1在AAC+NAC组与AAC组比较,表达明显升高,具有统计学意义。结论:1、低浓度过氧化氢抑制心肌细胞自噬的发生。2、在压力超负荷早期,大鼠心肌细胞自噬降低。3、抗氧化剂可抑制压力超负荷早期所致心肌细胞自噬的降低。
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