小儿急性白血病糖基化免疫球蛋白的表达与特性初步研究

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【背景与目的】:白血病是起源于造血干细胞的恶性克隆性疾病。在我国小儿白血病位于小儿恶性肿瘤的死亡率第一位,而复发一直是白血病治疗的一大难关。有文献报道,免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)的产生不再是B淋巴细胞所特有的免疫学功能,已发现上皮源性的肿瘤细胞等细胞中有Ig的异常表达,并且在肿瘤细胞的生长及存活时间上起重要作用。相关研究表明,卵巢癌患者的Con A结合型抗体(糖基化IgG、非对称IgG,asymmetric IgG,aIgG)占总IgG的比例(Con A index)较健康对照组高,从而推测Con A结合IgG可能具有封闭肿瘤抗原的效应,与肿瘤细胞免疫逃避及器官移植后的排斥的发生与发展有密切关系。据此,我们推测糖基化IgG与小儿白血病的分型、治疗、转归相关:小儿白血病是否与糖基化IgG有一定的关系?本研究将探讨白血病与非白血病患儿骨髓血浆中Con A index的差异,以及初步探讨糖基化IgG的生物学特性。  【材料与方法】:选取汕头大学医学院第二附属医院儿科2013年至2015年收治的1岁—15岁共34名的白血病患儿的骨髓血浆为实验组,其中实验组按照患儿治疗时间留取的骨髓情况分为初诊组、泼尼松试验第8天组、VDLD(诱导缓解治疗,VCR(长春新碱)+DNR(柔红霉素)+L-asp(左旋门冬酰胺酶)+DXM(地塞米松))第15天组、VDLD第33天组、VDLD完成3个月组、治疗1年组、治疗3年组等7组;选取汕头大学医学院第二附属医院儿科2013年至2015年收治的(需要行骨髓检查)2月—11岁共12名的非白血病患儿的骨髓血浆为对照组。通过Protein A-agarose及Con A-sepharose分离提纯骨髓血浆中糖基化IgG及非糖基化IgG(对称IgG,symmetric IgG,sIgG),用BCA法测蛋白浓度,算出Con A index后进行统计学分析。采用Western blot(蛋白免疫印迹试验法)检测aIgG、sIgG是否能与人、鼠、兔、羊IgG产生特异性反应。木瓜蛋白酶消化IgG后,采用Western blot检测aIgG的Fab段、Fc段是否能与人、鼠、兔、羊IgG产生特异性反应。  【结果】:1.白血病患儿的初诊时骨髓血浆的Con A index均值比对照组高,差异有统计学意义(P<0.01);2.随着白血病治疗,Con A index呈现缓慢下降的过程;3.骨髓血浆Con A index与性别无相关,差异无统计学意义;4. aIgG可以与各种属的IgG分子产生特异性反应,而sIgG则不能;5. aIgG的糖基化Fab段能与各种属的IgG发生特异性反应,而aIgG的Fc段则不能。  【结论】:1.初诊白血病患儿骨髓血浆Con A index高于对照组(P<0.01),有可能成为白血病早期诊断的肿瘤标记物之一。2.糖基化IgG在种属间非特异性免疫应答中起重要作用,而其糖基化的Fab段在该免疫应答中起主要作用,是机体体液免疫上的一重要作用。3.白血病细胞自我分泌的aIgG很可能与白血病细胞的免疫逃逸相关,能帮助白血病细胞逃脱机体的免疫监视功能,对白血病的发生、发展可能有重要意义!
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