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目的:本课题主要研究半枝莲(Scutellaria barbata D.Don)的化学成分,在此基础上进行了半枝莲中黄芩素含量测定的方法学研究,另外对半枝莲中总黄酮的提取工艺进行研究,为半枝莲的质量控制及进一步开发利用打下基础。
方法:本课题采用硅胶柱层析、聚酰胺柱层析、Sephadex LH-20及制备高效液相色谱等技术从半枝莲中分离纯化化学成分,并通过IR,ESI-MS,<13>C-NMR,<1>H-NMR等波谱技术结合理化性质及参考文献报道的数据鉴定化合物结构。
在系统研究化学成分的基础上建了半枝莲中黄芩素的高效液相色谱含量测定方法,以甲醇-水(7:3)作为流动相,检测波长为335nm,采用峰面积外标法计算含量。
以浸膏收率、总黄酮收率、野黄芩苷收率作为评价指标,选择了醇浓度(%)、醇倍量(倍)、提取时间(h)作为考察因素,利用正交试验L<,9>(3<3>)确定了半枝莲总黄酮的提取工艺。
结果:从半枝莲中分离得到二十三个化合物,鉴定了其中十八个化合物的结构,分别是:β一谷甾醇(β-Sitosterol Ⅰ)、对羟基苯甲醛(4-HydroxybenzaldehydeⅡ)、苯甲酸(Benzoic acid Ⅲ)、胡萝卜苷(Daucosterol Ⅳ)、肉桂酸(Cinnamicacid Ⅴ)、绿原酸(Chlorogenic acid Ⅵ)、香草酸(Vanillic acid Ⅶ)、汉黄芩素(Wogonin Ⅷ)、槲皮素(Quercetin Ⅸ)、芹菜素(Apigenin Ⅹ)、黄芩素(Baicalein Ⅺ)、柚皮素(Naringenin Ⅻ)、木犀草素(Luteolin ⅩⅢ)、野黄芩苷(Scutellarin ⅩⅣ)、黄芩苷(Baicalin ⅩⅤ)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Apigenin-7-O-B-D-glucopyranoside ⅩⅥ)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Luteilin-7-O-β-D-glucopyranoside ⅩⅦ)、硬脂酸(Stearic acidⅩⅧ)。
黄芩素含量测定方法学的精密度、稳定性、重现性均符合要求。优化了半枝莲总黄酮的提取工艺,并经验证实验证实提取工艺条件合理可行。
结论:已鉴定的化合物ⅢⅤⅥⅦⅨⅩⅥ为首次从该植物中分离得到。黄芩素的含量测定方法简单,准确,为半枝莲药材及其制剂质量控制方法提供依据。半枝莲中总黄酮提取工艺的确定为进一步为开发利用半枝莲打下基础。