在整个生命过程中，晶状体上皮细胞(Lens epithelial cells，LECs)几乎都在持续进行分裂，其子细胞不断从晶状体的生殖区迁移到赤道区、延伸，最后分化为晶状体纤维。我们以前的研究表明在兔晶状体中央区上皮细胞中可能存在晶状体干细胞，故本研究目的之一是进一步证实我们之前的结论。因此，作者以6月龄以下家兔为实验材料，分离其晶状体中央区和周边区上皮细胞，并分别将其用于体外原代培养。体外培养的细胞经RT-PCR和细胞免疫荧光技术分析，其主要结果如下：　　 1、不同区域的晶状体上皮细胞均能在体外培养成功；　　 2、RT-PCR和细胞免疫荧光结果均表明胚胎干细胞基因CD9和SOX2在原代培养的晶状体中央区上皮细胞中表达比在周边区明显强烈，差异显著。此结果进一步支持了晶状体中央区可能存在晶状体干细胞这一推论。　　 另一方面，众所周知晶状体上皮细胞是通过一个自我消除其细胞器等一系列过程而分化为晶状体纤维。而脱氧核糖核酸限制性内切酶DLAD(DNaseⅡ-like acid DNase，似二型脱氧核糖核酸酶)在晶状体上皮细胞的分化过程中对晶状体纤维的去核化起重要作用。编码DLAD蛋白的基因已被克隆，可是当时市场上尚无DLAD抗体出售，因此妨碍了对DLAD的功能进行研究。为使后续实验能顺利展开，本论文的另一部分内容则为准备用于研究晶状体上皮细胞分化的抗体——小鼠DLAD(mouse DLAD，mDLAD)多克隆抗体。为此，我首先制备并纯化了一种本实验室正积极研究的在脊椎动物眼睛和其它组织中起重要作用的蛋白——丝/苏氨酸蛋白磷酸酶2A催化亚基β(PP-2Acβ)的GST融合蛋白。以此融合蛋白为抗原，成功制备了识别视网膜色素上皮细胞(ARPE)中内源性PP-2A的抗血清。在此成功制备抗体的经验基础上，我积极准备制备DLAD多克隆抗体。然而，通过一系列研究我发现现有技术和方法几乎不可能在原核中诱导表达mDLAD基因。其中部分原因可能为DLAD编码的是一核酸内切酶，外源性表达该酶其可能会降解宿主DNA，因此宿主通过某种暂时尚未明确的机制阻止该外源性酶的表达以保护宿主自身。