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目的:非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)患病率高,且可能发展到难以逆转的非酒精性脂肪肝炎及纤维化阶段。研究表明,NAFLD的纤维化发展与食源或体内代谢紊乱产生的糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)高度相关。花色苷作为广泛存在的植物化学物,对多种毒物诱导的肝脏损伤展示出了良好的保护作用。本研究采用动物模型探讨花色苷的主要单体矢车菊素-3-葡萄糖苷(cyanidin-3-O-glucoside,C3G)对AGEs暴露下NAFLD的肝损伤的保护作用。方法:本研究选择成年雄性C57BL/6J小鼠建立NAFLD小鼠纤维化模型,通过高温烘焙AIN-93G饲料或者胆碱和蛋氨酸缺乏(methionine choline deficient,MCD)饲料产生外源性AGEs。所有小鼠根据体重随机分为5组,分别饲喂烘烤后的AIN-93G饲料(control);MCD饲料(MCD);烘烤后的MCD饲料(BMCD);烘烤后的MCD饲料+60 mg/kg灌胃剂量的C3G(BMCD+LC3G);烘烤后的MCD饲料+120 mg/kg灌胃剂量的C3G(BMCD+HC3G),前三组每天给予一定体积的生理盐水。记录小鼠摄食量及体重,5周后处死小鼠收集样本。我们通过H&E染色观察肝脏病理改变,利用天狼猩红染色观察肝脏纤维化程度。我们采用专用试剂盒测定肝脏中甘油三酯(triglyceride,TG)、血清中谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)和谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)的含量,通过血浆高通量蛋白芯片检测白介素1α(interleukin 1α,IL-1α)、白介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、单核细胞趋化因子1(monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1)等炎症相关的细胞因子的表达。另外,我们利用蛋白质组学筛选出感兴趣的差异蛋白,分析蛋白质的功能和通路。结果:H&E染色结果表明MCD模型小鼠出现较多脂肪空泡,脂肪蓄积情况明显,而AGEs能加重脂肪变性。C3G明显减轻了肝脏中出现的脂肪空泡,气球样变,炎症浸润和坏死程度,说明C3G能减轻AGEs暴露下非酒精性脂肪肝中脂肪蓄积。MCD导致血清中AST和ALT的含量显著升高,AGEs加重AST从肝脏向血液中的释放。C3G的干预显著降低AST和ALT的水平,显示出明显的肝脏保护能力。AGEs暴露下NAFLD小鼠的纤维化并没有明显发生,表明肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)的激活程度不高。通过蛋白质组学分析,我们鉴定出了4577个蛋白,并从中分批筛选出了332个、76个和20个感兴趣的差异蛋白。通过蛋白质功能分析及通路分析,发现C3G能有效调节能量代谢相关的通路,改善炎症作用,并与线粒体损伤、细胞外泌体、内质网等有明显的关联。结论:AGEs加重NAFLD小鼠脂肪蓄积和炎症反应,而C3G可以降低肝脏中TG的含量,并且抑制炎症因子的表达。C3G对AGEs暴露下NAFLD小鼠的保护作用可能是通过调节能量代谢相关的通路,改善炎症作用和线粒体的损伤,也可能是通过细胞外泌体和内质网发挥作用。本研究可以为非酒精性脂肪肝人群做出少摄入高温烹调食物、多摄入花色苷类食物的合理膳食指导提供实验依据,从而减轻甚至避免慢性肝病。