长期递增式香烟烟雾暴露对小鼠肺功能及肺组织炎症的影响

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研究目的吸烟是慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)最重要的危险因素。香烟烟雾与疾病发生的核心部位肺组织直接接触,激活多种炎症细胞,释放大量炎症细胞因子,进而损害破坏肺组织的正常结构,引起肺功能持续下降和一系列呼吸道症状,严重影响患者的生活质量和活动参与。建立COPD动物模型对COPD的临床研究有非常重要的作用,但过去研究大多聚焦在定量烟雾暴露构建COPD动物模型上,少有研究采纳长时间的递增式香烟烟雾暴露方案。基于此本研究采用长达25周的递增式香烟烟雾暴露方案,观察此方案对小鼠的肺功能、肺结构和肺组织炎症的影响,进一步完善制备COPD动物模型方案。研究方法将16只雄性SPF级8周龄C57BL/6J小鼠随机平均分为烟熏组和空白组,烟熏组进行递增式香烟烟雾暴露,空白组小鼠进行常规饲养不做任何干预,在25周实验期间内随时观察两组小鼠情况。烟熏结束后,两组小鼠先行肺功能检测,再进行处死取材、样本收集和分析处理。用HE染色、Masson染色分别观察比较两组小鼠的肺组织形态异同,用ELISA法分别检测两组小鼠支气管灌洗肺泡液BALF和肺组织的炎症因子IL-6、IL-8、IL-17和TNF-α的表达水平。研究结果1.肺功能检测结果显示,与空白组小鼠对比,25周烟熏后小鼠肺功能参数(FEV20、FEV50、PEF、MMEF、FRC)都有显著性差异(P<0.05),烟熏组的FVC有下降的趋势,但未达到统计学意义。2.肺组织病理学Masson染色结果显示与空白组小鼠对比,烟熏组小鼠的气管壁厚度增加,气道管腔狭窄,气道上皮细胞排列紊乱,气道壁有明显的胶原纤维堆积;HE染色结果显示,烟熏组小鼠肺组织可见炎症细胞浸润,支气管终末端明显扩大,肺泡间隔明显变薄,甚至部分断裂形成肺大疱。通过软件计算得到烟熏组小鼠肺泡横截面积显著高于空白组小鼠(P=0.005)。3.肺部炎症ELISA检测结果显示,与空白组小鼠对比,烟熏组小鼠BALF中的IL-6、IL-8、IL-17的表达水平有显著差异,TNF-α的表达水平有上升的趋势,但未达到统计学意义;烟熏组小鼠肺组织中的IL-6、IL-8、IL-17和TNF-α都有显著提高。研究结论1.25周递增式香烟烟雾暴露后,小鼠肺容量被破坏,出现通气功能和小气道功能的下降;有明显的小气道病变和肺气肿的病理变化形成;小鼠的肺组织、小气道的炎症反应明显加重;2.25周递增式香烟烟雾暴露方案可以成功构建COPD小鼠模型。
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