【摘 要】
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目的:第一部分检测Evi-1、JNK、c-Jun在结直肠癌中表达水平,并分析Evi-1、JNK、c-Jun蛋白表达与结直肠癌患者临床病理特征之间的关系,评估Evi-1在直肠癌c-Jun N末端激酶(JNK)/c-Jun通路的调控作用,探索Evi-1在结直肠癌凋亡过程中的作用。第二部分检测TRAPPC9、JNK、LC3在结直肠癌中表达水平,并分析TRAPPC9、JNK、LC3与结直肠癌患者临床病理特
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目的:第一部分检测Evi-1、JNK、c-Jun在结直肠癌中表达水平,并分析Evi-1、JNK、c-Jun蛋白表达与结直肠癌患者临床病理特征之间的关系,评估Evi-1在直肠癌c-Jun N末端激酶(JNK)/c-Jun通路的调控作用,探索Evi-1在结直肠癌凋亡过程中的作用。第二部分检测TRAPPC9、JNK、LC3在结直肠癌中表达水平,并分析TRAPPC9、JNK、LC3与结直肠癌患者临床病理特征之间的关系,探索TRAPPC9通过JNK信号通路对结直肠癌自噬的影响。方法:第一部分从癌症基因组图谱下载了394例结直肠癌患者的临床病理资料和基因Evi-1 mRNA表达量。并且,在96例结直肠癌组织及癌旁正常粘膜组织中,使用免疫组织化学方法检测Evi-1,JNK和c-Jun蛋白表达水平。运用t检验和卡方检验对数据进行统计学分析,P<0.05被认为差异具有统计学意义。第二部分在人结肠癌细胞株HCT116和人正常结肠粘膜上皮细胞株NCM460中,使用实时荧光定量PCR检测TRAPPC9 mRNA表达量;免疫组织化学法检测TRAPPC9、JNK和LC3蛋白在80例结直肠癌/癌旁正常组织中表达水平。运用t检验和双尾卡方检验对数据进行分析,P<0.05被认为差异具有统计学意义。结果:第一部分TCGA数据表明Evi-1 mRNA在结直肠癌中高表达,并且,Evi-1 mRNA表达与淋巴结转移,T分期,远处转移和TNM分期显著相关(P<0.05);免疫组织化学染色结果显示,Evi-1、JNK和c-Jun的Remmele免疫反应评分在结直肠癌组织中表达高于癌旁正常粘膜上皮组织,Evi-1在结直肠癌组织和癌旁正常粘膜上皮组织中的阳性表达率分别为65.6%(62/96)和11.5%(11/96),JNK在结直肠癌组织和癌旁正常粘膜上皮组织中的阳性表达率分别为59.4%(57/96)和18.9%(18/96);c-Jun在结直肠癌组织与癌旁正常粘膜上皮组织中的阳性表达率分别为55.2%(53/96)和21.9%(21/96);此外,结直肠癌组织中的Evi-1与JNK蛋白表达呈负相关(r=-0.435,p=0.00002),结直肠癌组织中的Evi-1与c-Jun蛋白表达呈负相关(r=-0.448,p=0.00001);结直肠癌组织中Evi-1,JNK和c-Jun的表达与结直肠癌的分化程度,T分期,淋巴结转移,远处转移和TNM分期显著相关(P<0.05);与患者性别、患者年龄、和浸润深度无统计学意义。第二部分免疫组织化学结果显示TRAPPC9在结直肠癌组织与癌旁正常粘膜上皮组织中的阳性表达率分别为65%(52/80)和26.3%(21/80),JNK在结直肠癌组织与癌旁正常组织中的阳性表达率分别为68.8%(55/80)和20%(16/80);LC3在结直肠癌组织与癌旁正常粘膜上皮组织中的阳性表达率分别为61.3%(49/80)和23.8%(19/80)。结直肠癌组织中TRAPPC9与JNK表达呈正相关(r=0.693,p=0.0000)、TRAPPC9与LC3表达呈正相关(r=0.331,p=0,0031)、JNK与LC3表达呈正相关(r=0.405,p=0.0003),分析TRAPPC9、JNK及LC3表达水平与临床病理参数的相关性,与分化程度、T分期、淋巴结转移、远处转移和TNM分期显著相关(P<0.05);与患者性别、患者年龄、和浸润深度无统计学意义。实时荧光定量PCR结果提示结肠癌细胞株HCT116中TRAPPC9 mRNA表达量高于正常结肠细胞株NCM460,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:第一部分Evi-1在人结直肠癌组织中高表达,并与人结直肠癌的临床进展密切相关;Evi-1联合JNK和c-Jun可以作为评估结直肠癌预后的指标,靶向Evi-1可能是治疗结直肠癌的新方法。第二部分TRAPPC9在人结直肠癌中高表达,并与结直肠癌临床进展密切相关;TRAPPC9有望成为结直肠癌预测生物标志物以及联合治疗中的潜在靶标。
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