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背景和目的近年来,骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cells,BMMCs)已经成功应用于软骨缺损的修复。软骨细胞的增殖和分化在软骨修复中起重要作用,然而BMMCs对其增殖、分化效果的影响仍不清楚。故在这个研究中,我们探索了在细胞聚集体培养条件下BMMCs对软骨细胞分化的影响。方法我们分别分离了BMMCs和软骨细胞,并将其以1:1(BMMC/C)的比例混合后以细胞聚集体的形式(每个细胞聚集体含有1.6×106个细胞)在体外分别培养2、4和8周。我们接着分别通过大体观察、组织学检测、免疫组化和基因表达分析来评估软骨细胞的分化状态。结果随着培养时间的延续,BMMC/C组和软骨细胞组均表现出透明而光滑的表面。在培养4周后,BMMC/C组的面积小于软骨细胞组,而至培养8周后,BMMC/C组展现出更大的面积(P=0.003)。软骨特异性细胞外基质(extracellular matrix,ECM)包括糖胺多糖(glycosaminoglycan,GAG)和Ⅱ型胶原的分布随着软骨细胞组的培养进程而逐渐减少。然而,BMMC/C组在经历了2周和4周的体外培养后,未发现ECM的分布发生显著改变。在体外培养8周后,BMMC/C组ECM的沉积发生明显的减少。同时,我们发现与软骨细胞组相比,BMMC/C组随着培养时间的延续表现出软骨特异性基因的上调。结论总之,我们的研究结果显示在以细胞聚集体形式行体外培养时,BMMCs能够延缓软骨细胞的去分化进程。这表明未培养的BMMCs是一种能被快速并安全获取的细胞,且能作为一种用于软骨组织工程研究的潜在细胞来源。