何首乌(Polygonum multiflorum Thunb.)为我国传统的中草药之一,生首乌系蓼科植物何首乌的干燥块根,具有解毒、消痈、截疟、润肠通便之功效；制首乌是何首乌的炮制品,具有补肝肾、益精血、乌须发、强筋骨之功效；首乌藤为何首乌的干燥藤茎,具有养血安神、祛风通络之功效。然而,产地、采收、加工、炮制等因素对何首乌药材的有效成分造成一定的影响,导致药材质量参差不齐。如何在药材生产过程中,保证何首乌药材的优质和质量均一已成为其生产过程中的关键问题。本课题采用现代分析技术,对何首乌药材中多元指标成分进行系统分析,比较不同产地、炮制前后和同基源不同入药部位药材中指标成分的差异,并考察不同采收时间、加工方法药材中指标成分的变化；采用UPLC-Triple TOF-MS/MS技术对何首乌进行植物代谢组学研究,分析不同采收时间、不同产地、加工方法、炮制前后和同基源不同入药部位药材的化学成分,筛选和鉴定差异化学成分；建立何首乌HPLC和脂溶性成分GC-MS指纹图谱。从而为探索何首乌药材品质形成过程、选择适宜产区及适时采收和合理加工提供基础资料和科学依据。课题研究内容主要包括以下几个方面：1、文献研究系统查阅何首乌国内外相关文献,对其进行文献综述研究。2、何首乌多元指标成分的分析研究采用现代分析技术分析比较不同产地、炮制前后和同基源不同入药部位药材中指标成分的差异及不同采收时间、加工方法药材中指标成分的变化,并采用主成分分析与Topsis等对何首乌中指标成分进行综合评价。建立UPLC-TQ/MS同时测定何首乌中二苯乙烯(二苯乙烯苷、虎杖苷和白藜芦醇)、蒽醌(大黄素、大黄素甲醚、芦荟大黄素、大黄酸和大黄素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷)、黄酮(表儿茶素、芦丁、金丝桃苷、紫云英苷和槲皮素)及酚酸(没食子酸)4类成分含量的方法；建立MEKC-DAD同时测定何首乌中二苯乙烯苷、蒽醌(大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄酸和大黄素甲醚)和儿茶素含量的方法；建立QTRAP LC-MS/MS同时测定何首乌中10种核苷类成分(尿嘧啶、胞苷、鸟嘌呤、2’-脱氧胞苷、尿苷、腺嘌呤、肌苷、鸟苷、胸苷和腺苷)含量的方法；采用UV-VIS测定何首乌中总多糖、总磷脂和总鞣质的含量；采用ICP-MS测定何首乌中24种无机元素；采用GC-MS分析何首乌和首乌藤中挥发性成分；采用衍生化GC-MS分析何首乌中脂肪酸组成及相对含量。结果显示：不同采收时间、不同加工何首乌中指标成分呈现动态变化；不同产地及商品药材、炮制前后和同基源不同入药部位药材中指标成分具有一定差异。3、何首乌UPLC-Triple TOF-MS/MS植物代谢组学研究基于UPLC-TripleTOF-MS/MS技术结合多元统计分析,对不同采收时间、产地、加工方法、炮制前后及同基源不同入药部位何首乌中化学成分进行分析,筛选和鉴定差异化学成分,并探讨其变化规律。结果显示：不同采收时间何首乌中筛选出9个共有差异成分,且呈现出动态变化的趋势；不同产地何首乌中化学成分组成差异显著,筛选出12个共有差异成分；不同加工方法何首乌中筛选出15个共有差异成分,且呈现动态变化；炮制前后何首乌中化学成分差异显著,生首乌中检测到儿茶素葡萄糖苷、二苯乙烯-葡萄苷酸、Emdin-O-glucoside sulfate和番泻苷元A,而制首乌中未检测到上述成分,但检测到5-羟甲基糠醛,同时炮制前后样品中还筛选出14个共有的差异化学成分；同基源不同入药部位何首乌中检测到奎尼酸、莲花掌苷、没食子酸、3,8-dihydroxy-1-methoxyxanthone、土大黄苷、白藜芦醇-4’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、ω-羟基大黄素、大黄酸、3,6-二甲氧基-2,5,7,8-四羟基萘醌、大黄素甲醚,而首乌藤中检测到紫胶酸-D-8-O-(6’-O-桂皮酰)-吡喃葡萄糖苷、原始车菊素B-7-3-O没食子酰、儿茶素三聚体、Aloesone-7-O-β-D-glucopyranoside、 3,4’,5-trihydroxystlbene-4’-O-β-D-(6"-O-galloyl)-glucopyranoside、吡喃葡萄糖基三羟基甲基蒽酮、大黄素甲醚-8-O-β-D-龙胆二糖苷,此外同基源何首乌和首乌藤中还筛选出12个共有的差异化学成分。4、何首乌的指纹图谱研究研究建立不同产地何首乌HPLC指纹图谱及脂肪酸衍生化GC-MS指纹图谱,并做模糊聚类分析和相似度评价。初步建立了以19个共有峰为特征指纹信息的何首乌HPLC指纹图谱以及9个共有峰为特征指纹信息的何首乌脂肪酸的指纹图谱。方法准确可靠,重现性好,达到中药指纹图谱的技术要求,可用于何首乌药材内在质量的评价和控制。