目的: 对21例临床诊断为线粒体细胞病的患儿进行线粒体基因突变分析,明确患儿致病基因所在,观察基因型与表型的关系,为临床提供线粒体基因突变所致线粒体细胞病的基因诊断方法,并为线粒体细胞病遗传咨询和产前诊断提供方法和实验依据。 方法: 用试剂盒提取研究对象外周血基因组DNA,PCR扩增线粒体基因3243、8344、8993三个热点突变及已报道的62个常见突变位点所在片段,运用DNA直接测序法检测是否存在突变。若检测出突变,则选取70例健康成人作为对照组,运用PCR-DNA直接测序方法或者PCR-RFLP方法对测出的未被报道的突变位点进行对照研究,总结临床病例特点。 结果: 1. 2例患儿存在线粒体基因3243 A→G突变。两患儿主要表现为头痛、呕吐及抽搐,头颅CT示双侧基底节钙化。 2. 1例患儿存在线粒体基因8993 T→G突变。患儿主要表现为气促、抽搐、严重代谢性酸中毒、高乳酸血症,头颅MRI示脑白质广泛水肿,两侧基底节区、脑桥内可见多个对称性“亮灯泡征”；脑萎缩。 3. 1例患儿存在线粒体基因15765 G→A突变。患儿表现为严重代谢性酸中毒、高乳酸血症、黄疸、肝功能异常,头颅CT示两大脑实质弥漫性对称性低密度灶。 4. 1例患儿存在线粒体基因7496 T→C突变。患儿主要表现为精神运动发育倒退,听力严重受损,反复发作性代谢性酸中毒、持续性高乳酸血症、高氨血症,多次头颅CT和MRI检查示进行性脑萎缩、双侧额顶叶对称性低密度灶。 5.4例患儿分别发现有4个多态性位点。 6. 12例患儿尚未发现任何突变。 结论: 1. 线粒体基因突变足导致线粒体细胞病的原因之一。 2. 线粒体基因15765 G→A突变与7496 T→C突变可能是新型突变。 3.本 研究采用的PCR-DNA直接测序法是检测线粒体基因突变的一种可靠、有效方法。