目的:反复自然流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)是指与同一性伴侣连续发生3次或3次以上自然流产。RSA是妊娠常见的并发症之一。据文献报道,RSA占总妊娠的1%左右[1],占早期自然流产的15%-20%。由于RSA基本为在妊娠早期发生反复性的流产,且多发生于相同的妊娠月份,对患者身心及其家庭都带来了严重的影响。另外多次流产还存在继发不孕的可能性。RSA的病因除已知因素外,目前仍有超过50%原因不明[1]。因此对不明原因的RSA病因及其机制的研究也成为了国内外的热点。肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor,HGF)是一种来源于间质细胞的多效性细胞因子,在形成、维持及重塑多细胞组织结构等方面有重要的调节作用。在胎盘中HGF主要由绒毛间质细胞分泌,在调节胎盘形态发生、增加滋养细胞迁移及侵袭、促进胎盘血管发生等方面发挥着重要的作用。研究表明缺乏HGF可导致胎盘形成障碍而引起胚胎的早期死亡。还有研究发现当组织损伤时HGF合成增加,促进损伤愈合。血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)是调节胎盘血管生成的重要因子,有研究显示在RSA中,VEGF水平下降[2],但也有研究得出相反的结论,未能达成一致。目前国内尚未有关HGF在RSA患者中表达水平的报道。本研究通过测定HGF及VEGF在RSA患者绒毛及蜕膜中的表达,与正常早孕组相比较,探讨其与不明原因反复流产的关系。方法:完全随机选取2010年7月至2011年2月在河北医科大学附属第二医院妇产科门诊就诊的反复自然流产患者20例为反复自然流产组。病例选择条件:既往发生过3次或3次以上自然流产,无急、慢性疾病,排除染色体异常,生殖器官异常,内分泌异常,免疫因素,感染因素等可能引起流产的因素;完全随机选择同期同医院要求行人工流产的正常健康早孕妇女为对照组。两组选取病例经统计学分析,年龄、停经天数、胎囊大小均无统计学差异。所有病例负压吸取宫腔内容物后,立即用0.9%氯化钠溶液漂洗干净血迹后,迅速分离绒毛及蜕膜各约1.0×1.0×1.0cm,置于4%多聚甲醛溶液中固定24-48小时,常规脱水、透明、石蜡包埋、统一切片、HE及免疫组化染色、观察结果,采用四级半定量法进行结果分析。结果:1 HGF在绒毛中的表达结果:HGF在绒毛中主要表达于滋养细胞胞浆及合体滋养细胞细胞核中,正常绒毛中染色均匀,着色较浅,RSA组中染色较深(图3)。RSA组绒毛中HGF表达高于NEP组,差异有显著性(t=28.697,p<0.01,表2)。2 HGF在蜕膜中的表达结果:HGF在蜕膜中主要存在于腺上皮细胞胞浆中,NEP组部分蜕膜细胞核可见着色,RSA组中可见大量蜕膜细胞核着色,染色较NEP组深(见图4)。RSA组蜕膜中HGF表达高于NEP组,差异有显著性(t=20.228,p<0.01,表3)。3 VEGF在绒毛中的表达结果: VEGF主要表达于绒毛细胞滋养细胞和合体滋养细胞的胞浆中,细胞核未见明显着色。RSA组着色较NEP组深(见图5)。RSA组绒毛中VEGF表达高于NEP组,差异有显著性(t=11.34,p<0.01,表4)。4 VEGF在蜕膜中的表达结果:VEGF主要表达于蜕膜细胞、腺上皮细胞和血管内皮细胞胞浆中,细胞核未见明显着色。RSA组着色较NEP组深(见图6)。RSA组绒毛中HGF表达高于NEP组,差异有显著性(t=2.389,p<0.05,表5)。5 HGF与VEGF的相关性分析结果:在NEP组及RSA组中,HGF及VEGF间均不存在线性相关关系( r1=0.016,p>0.05.r2=0.145,p>0.05. r3=0.334,p>0.05.r4=0.134,p>0.05)。结论:1 RSA患者绒毛与蜕膜中HGF的表达高于对照组,且差异具有显著性。提示RSA的发生与HGF的升高存在相关性。2 RSA患者绒毛与蜕膜中VEGF的表达高于对照组,且差异具有显著性。提示RSA的发生与VEGF的升高存在相关性。3 HGF与VEGF间不存在线性相关关系。