妊娠诊断作为动物高效繁殖技术的重要环节,对减少空怀、实施精细化管理、降低饲养成本、提高繁殖效率和养殖效益等方面具有重要作用。目前,以生殖激素作为早期妊娠诊断依据的标准不统一,关于绵羊早期妊娠诊断蛋白质组学的研究鲜有报道。本试验在研究湖羊母羊同期发情前后主要生殖激素的变化的基础上,着重研究了妊娠早期和非妊娠母羊血清生殖激素、妊娠相关糖蛋白（PAG）含量的差异,并采用蛋白质组学进行了妊娠差异蛋白的筛选,以期获得早期妊娠诊断标识的关键生殖激素或差异蛋白,为早期妊娠诊断提供依据。试验母羊分为Ⅰ组20只,挑选发情母羊但不配种,记为F组,分别在放栓、撤栓和发情盛期采血,用ELISA检测孕酮（P₄）、雌二醇（E₂）、促卵泡素（FSH）、促黄体素（LH）的变化;Ⅱ组60只发情后配种,在第0 d、7 d、14 d、18 d、22 d、26 d、30 d采血,同时在第0 d、7 d、14 d、18 d对F组母羊采血,用ELISA检测P₄、E₂、FSH、LH、硫酸雌酮（E₁S）、妊娠相关糖蛋白（PAG）的含量,第45 d用B超诊断分为妊娠组（P组）和未妊娠组（N组）,并通过蛋白质组学的方法筛选妊娠差异蛋白。结果表明:1.同期发情处理的母羊,发情盛期时血清P₄浓度最高,显著高于放栓和撤栓时血清P₄的浓度（P<0.05）,血清E₂,FSH和LH浓度在母羊发情盛期时较高,显著高于放栓时浓度（P<0.05）;2.P组母羊在配种后第14 d、18 d血清P₄浓度和E₁S浓度显著高于F组和N组（P<0.05）,第22 d、26 d、30 d显著高于N组（P<0.05）;P组母羊在配种后第14 d血清PAG浓度显著高于F组和N组（P<0.05）,第22 d、26 d、30 d显著高于N组（P<0.05）;在第30 d P₄浓度高于16.5 ng/mL,E₁S浓度高于1.7 ng/mL,PAG浓度高于42 ng/mL可作为同期发情母羊早期妊娠诊断的阈值标准。P₄作为妊娠指标的可靠性为100%,PAG为80%,E₁S为88%,还需要进一步扩大试验群体数量进行验证。3.本试验通过蛋白质组学方法初步筛选出了四种妊娠差异蛋白,分别为Fibrinogen like 1（FGL1）、Protein disulfide-isomerase（PDIA3）、Myosin heavy chain 9（MYH9）、Matrix gla protein（MGP）,其中FGL1上调,PDIA3,MYH9,MGP下调,可作为早期妊娠诊断的关键蛋白,为进一步研究妊娠差异蛋白奠定了基础。