TNF-α对鼠根尖乳头干细胞增殖及多向分化能力影响的实验研究

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目的:研究肿瘤坏死因子-α对鼠根尖乳头干细胞增殖及多向分化能力的影响,初步探讨肿瘤坏死因子-α对根尖乳头干细胞生物学特性的影响。方法:将细胞分为实验组(肿瘤坏死因子-α浓度为5、10、15、20、30、40、50ng/mL)和对照组(肿瘤坏死因子-α浓度为0ng/mL),使用CCK-8法检测细胞的增殖能力;采用碱性磷酸酶活性、茜素红染色及实时定量PCR检测细胞成骨/成牙本质能力;油红O染色检测细胞成脂能力;实时定量PCR检测血管相关基因的表达。结果:CCK-8显示:各浓度组均能促进根尖乳头干细胞增殖(P<0.05),其中10ng/m L肿瘤坏死因子-α的促进作用最为显著;碱性磷酸酶活性显示:各浓度组均能明显降低根尖乳头干细胞的碱性磷酸酶活性(P<0.05);茜素红染色显示:随着肿瘤坏死因子-α浓度的增加,矿化结节逐渐变小,形成数量也逐渐变少;实时定量PCR显示:3天,实验组骨钙蛋白、牙本质涎磷蛋白、牙本质基质蛋白-1表达量降低,其中骨钙蛋白、牙本质基质蛋白-1差异具有统计学意义(P<0.05),骨涎蛋白表达量增加(P<0.05)。7天时,骨钙蛋白、牙本质涎磷蛋白、牙本质基质蛋白-1表达量降低,其中牙本质基质蛋白-1差异具有统计学意义(P<0.05),骨涎蛋白表达量与对照组相比仍稍有增加(P>0.05);14天时,骨涎蛋白、骨钙蛋白、牙本质基质蛋白-1表达量均明显降低(P<0.05),牙本质涎磷蛋白表达量稍有增加(P>0.05)。油红O染色结果显示:实验组随着肿瘤坏死因子-α浓度的增加,脂滴形成数量逐渐减少;实时定量PCR显示:3、7天时,血管生成素1、血管内皮生长因子A、血小板内皮细胞黏附分子-1表达量降低(P<0.05)。结论:肿瘤坏死因子-α对根尖乳头干细胞的增殖有明显促进作用,且抑制根尖乳头干细胞的成骨/成牙本质、成脂能力及血管相关基因的表达。
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