【摘 要】
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本文采用反转录技术、常规PCR及半套式PCR法,从人外周血淋巴细胞中,扩增出人抗体重链Fd基因和轻链基因,扩增产物的分子量与国内外同类报道一致。首先将扩增出的抗体重链Fd基因克
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本文采用反转录技术、常规PCR及半套式PCR法,从人外周血淋巴细胞中,扩增出人抗体重链Fd基因和轻链基因,扩增产物的分子量与国内外同类报道一致。首先将扩增出的抗体重链Fd基因克隆入PComb3载体中,转化大肠杆菌构建了重链Fd基因插入率近60%,库容量3×106的人抗体重链基因库。进一步将抗体轻链基因克隆入该库内。经辅助噬菌体感染,得到噬菌体滴度为5.1×1014CFU/ml的人源性噬菌体抗体库。库中含有抗体重链和轻链基因的噬菌体占25%。用固相化甲肝抗原,对所构建的噬菌体抗体库进行了三轮淘筛。第三轮淘筛后洗脱下来的噬菌体,较第一轮增加了近100倍。含有抗体重链基因和轻链基因的重组克隆,也由淘筛前的
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