牛蛙T、B淋巴细胞的主要生物学特性研究

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liangwang112
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本试验主要通过体外培养牛蛙淋巴细胞来研究淋巴祖细胞集落形成率、增殖能力和对药物的敏感性等多种生物学特性,以及通过染色来研究淋巴细胞在免疫器官中的含量及分布,试验结果如下: 第一部分:按比例配好的细胞培养液60ml中加入0.30ml双抗母液,用5.6%NaHCO3溶液调培养体系的PH为7.3,使细胞最终浓度为2×105/ml,放于培养箱中培养。第一周时,淋巴细胞系祖细胞集落产率147.33±2.52/(2×105),第二周时,其集落产率为224.00±3.61/(2×105),第三周时,集落产率为192.33±4.04/(2×105)。 第二部分:取牛蛙外周淋巴细胞进行表面标志研究,证实了牛蛙T淋巴细胞有绵羊红细胞受体,并检测到总花环形成率为36.25±3.10%,活性花环形成率为22.50±1.92%,稳定花环形成率6.75±0.50%,B淋巴细胞有补体(C3)和FC受体,其花环形成率分别为45.33±3.51%和55.67±3.54%。 第三部分:取牛蛙免疫器官骨髓、胸腺、脾脏和肾脏,一部分进行涂片和ANAE染色,另一部分于Carnoy液固定一周,石蜡包埋,H.E和MG-P染色。研究发现:骨髓中B淋巴细胞的百分含量为77.20±2.02%,和T淋巴细胞一样,主要分布在红骨髓中,白骨髓中细胞很少;胸腺中T淋巴细胞含量为74.88±9.58%,多数分布在髓质部,B淋巴细胞主要分布于皮质部;脾脏B淋巴细胞含量丰富,其主要分布在白髓部,而含量为16.33±1.44%的T淋巴细胞,主要分布在红髓部位;肾脏中T淋巴细胞的含量为28.50±0.29%,主要分布在皮质部,B淋巴细胞主要分布在髓质部。 第四部分:用0.67%的生理盐水将Percoll分离液配成不同相对体积质量的分离液,进行牛蛙外周血液分离试验,测得能够有效地分离出牛蛙外周血淋巴细胞的相对体积质量为1.060-1.065的Percoll分离液。用尼龙棉分离出T、B淋巴细胞,将其放于22℃和28℃下,分别进行植物凝集素和金黄色葡萄球菌蛋白A的增殖反应,结果发现:对照组T淋巴细胞随着温度上升,细胞转化率上升2.00%,而B淋巴细胞转化率只增加0.66%;在相同浓度不同刺激原作用下,T淋巴细胞转化率明显高于B淋巴细胞,t检验为显著性差异。 第五部分:将T、B淋巴细胞放于不同药物的不同浓度中进行培养,22℃的培养结果显示只有1000呵ml庆大霉素组中T、B淋巴细胞的细胞毒数为69.94士互.51%和72.36士1.89%,其它均低于50.00%。温度增室28℃时,环磷酞胺对T淋巴细胞有毒性作用,对B淋巴细胞无毒性作用;庆大霉素在500呵ml以上对T、B淋巴细胞均有毒性作用;链霉素250均岁ml以上对T、B淋巴细胞均有毒性作用。
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