前言 国产药物羟基喜树碱(HCPT)是DNA拓扑异构酶Ⅰ(TopoⅠ)抑制剂，是细胞周期特异性药物，它在肿瘤细胞中持续时间长，含量高，动物实验及临床研究都表明对治疗多种肿瘤有效。羟喜作为化疗药物对免疫力也有一定抑制作用。动物实验报道，在喜树碱类联合免疫制剂治疗中可能会增加疗效。 目前对癌症晚期的腹膜转移治疗虽有很多药物疗法且有一定疗效，但还存在一些问题。剂量大虽可产生较好疗效，但严重的副作用往往会影响进一步治疗。近年已有免疫化疗治疗晚期肿瘤的报道，可是化疗联合免疫制剂治疗癌腹膜转移还处于探索阶段。对于腹腔免疫化疗的药物种类，浓度和剂量，给药次数及顺序，还有间隔时间等诸多问题还有待于今后得到解决。本实验探讨了羟基喜树碱(10-HCPT)及其伍用免疫制剂治疗腹膜转移癌的疗效及不同给药剂量对疗效的影响。 实验材料与方法 实验材料： 10-HCPT注射液，湖北黄石飞云制药有限公司010902。北京远策药业有限责任公司远策欣(注射用重组人白介素-2)000701A。沈阳三生制药股份有限公司因特芬(注射用基因工程干扰素α-2a)20010301。昆明鼠购自本校动物室，艾氏腹水瘤细胞购自本校免疫研究室，自行传代培养。主要实验设备包括离心机，超净台，显微镜，手术器械，染色设备等。 实验方法： ＊建立艾氏腹水瘤的昆明鼠模型复苏冻存细胞，无菌接种于18－20克雌性健康昆明鼠，观察腹水的增长，6－9天无菌取足量腹水。PBS洗两次离心后计数细胞，定浓度2500矽Inl，无菌接种于动物腹腔0．ZInl。接种腹水瘤细胞后48小时后，进行治疗。治疗完成后3天杀死，观察结果。 2．测量腹水量腹水量较大时直接抽取，少时则注人 lzllirBS后抽取计算得差。 3．细胞计数显微镜下计数后，采用H－E染色计数200细胞定量，求出确切数值。 实验方案：实验采用两因素析因设计，一因素为羟喜不同给药方式，另一因素为不同免疫药物，分别设立对照，数据分析采用S陀Sic．0进行方差分析，检验所得结果。P＜o．05为差异显著。每组小鼠均为6 ／q。具体分组为大剂量一次给药组：10－HCPT·20mg／kg xl次，腹腔注射 Z／J’剂量分次给药组：10－HCH 6．6mg／kg／次＊ a日，连用 3日腹腔注射；IL－2：12．5 Nk矿次＊似日，连用 3日，腹腔注射；IFNa－Za：25wk破次，ltw日，连用 3日，腹腔注射；空白对照：等量生理盐水腹腔注射，用法同实验组。 结 果 各治疗组间瘤细胞数比较及疗效分析：羟喜的各组疗效进行双因素分析（采用LOG法转换数据）发现，两种投药方式间有差异h＜0．001L免疫药物间有差异h＜0．0001X且存在交互作用h二 0．002）；即小剂量分次给药组腹水瘤细胞数少于大剂量一次给药组。进一步分析组间差异采用 SNK门检验人结果表明羟喜联合免疫制剂组疗效好于单用羟喜组；其中，联合IL－2组较联合IFN组疗效好。 ·2· 使用羟喜的各组作单因素分析比较结果表明，组间差异显著h＜0．001八 SNK门检验）表明羟喜小剂量分次给药联合 IL－2组及联合IFN组间无差异，但都好于单用羟喜组。羟喜大剂量联合IL－2组腹水瘤细胞数少于联合IFN组和单纯给药组，后两组间无差别。小剂量组疗效均佳。 未使用羟喜的免疫制剂治疗组组间单因素分析比较，组间差异显著h＝0．022人单独免疫药物治疗有效。Q检验表明 IL－2组和IFN组瘤细胞数少于空白对照组，但前两者间无差异。 “羟喜疗效判定选一疗效最差的羟喜治疗组与免疫治疗组疗效最好的一组进行t’检验比较，前者疗效显著好于后者k＜0．见二）。 腹水量比较分析：羟喜组、羟喜十几一2及羟喜门FN组（无论大小剂量）疗效均极佳，腹水量均接近零。而空白对照组腹水量为3．m7 LO．5四M，WN组3．933 LO．刀gd．和几一2组3．旭0。0．268 nl．腹水量较多，但瘤细胞数少于空白对照组。 讨 论 腹腔化疗提高了腹膜局部药物浓度和持续时间，可减轻全身副作用，在临床广泛应用。大剂量间歇用药的疗效得到肯定，因为它能杀灭更多瘤细胞，且在间歇期使造血系统等正常组织得以修复与补充，有利于提高机体的抗瘤能力及减少耐药性。但临床上常有患者因大剂量腹腔化疗所导致的消化道反应或骨髓抑制等副作用而终止治疗。本实验所研究的羟基喜树碱在肿瘤细胞中持续时间长，含量高，与常用的抗肿瘤药物无交叉耐药性，但对免疫力也有一定抑制作用。生物反应调节剂（BRM）与肿瘤化疗药物联用时，能提高患者的抗肿瘤能力并防止肿瘤化疗对免疫系统和造血系统造成的损害。本实验采用羟基喜树碱的两种给药方式联合 ·3· 生物反应调节剂治疗癌性腹水，研究疗效变化。结果显示小剂量 分次给药疗效较好，IL一二组和IFN组单独用药有治疗效果，联合 免疫制剂疗效好且与IL－2有协同作用。羟喜小剂量分次给药疗效好提