SFRP1在宫颈鳞癌组织中的表达及其调节机制分析

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目的:检测分泌型frizzled相关蛋白1(secreted frizzled-related protein-1, SFRP1)在宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变及宫颈炎患者组织与血清中表达水平,探索其在宫颈癌的发生发展中的调节机制,同时为早期诊断提供有效检测指标。方法:1、样本采集2、HE染色分析比较宫颈鳞癌组织、宫颈上皮内瘤变及宫颈炎组织的组织学差异性。3、免疫组化检测SFRP1在宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变及宫颈炎组织中的表达差异4、Real-time PCR定量分析SFRP1基因在宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变及宫颈炎组织表达水平5、Western blotting分析宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变及宫颈炎组织的蛋白表达6、ELISA检测SFRP1在血清中的表达。结果:1、HE染色显示,宫颈炎显示粘膜下及粘膜内鳞柱状上皮血管增生、扩张并充血,伴慢性炎细胞浸润。宫颈上皮内瘤变(CIN)显示乳头假性纤维脉管素,鳞状上皮增生主要以棘层增生为主。宫颈癌(SCC)显示层状细胞增生,细胞出现多形性,可见癌细胞槽,宫颈癌组织样本显示高度分化鳞状细胞癌。2、免疫组化染色显示,SFRP1蛋白表达于宫颈上皮内瘤变组、宫颈炎组,主要表达细胞的胞质中,呈棕黄色或黄褐色颗粒状染色,而在宫颈鳞癌组织未见明显表达3、随机抽宫颈癌、宫颈上皮内瘤变及宫颈炎患者样本性定量PCR检测,对扩增片段大小验证,结果显示所扩增片段与预设片段大小一致,无杂带,为特异性扩增。基因定量PCR分析显示,SFRP1基因表达水平在宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变组较宫颈炎组明显减少,差异具有统计学差异。4、随机抽取宫颈炎、宫颈上皮内瘤变与宫颈癌患者样本行western blotting分析,SFRP1蛋白表达水平在宫颈鳞癌组较宫颈上皮内瘤变及宫颈炎组,均明显减少。5、ELISA检测显示,SFRP1蛋白在宫颈鳞癌与宫颈上皮内瘤变患者血清较宫颈炎患者血清的表达均明显减少,差异具有显著性。宫颈上皮内瘤变与宫颈鳞癌患者血清表达无明显差异。结论:1、SFRP1可能在宫颈鳞癌的发生发展中具有重要的调节功能,SFRP1表达水平的降低推进宫颈癌的发生发展。2、SFRP1在宫颈鳞癌与宫颈上皮内瘤变患者血清中,表达水平明显降低,SFRP1有可能成为其宫颈癌的早期诊断指标。
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