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研究背景与目的Survivin属于凋亡蛋白抑制因子（inhibitor of apoptosis protein,IAP）家族成员,呈组织与周期特异性高表达于人类大多数肿瘤组织,并且与肿瘤细胞的凋亡、细胞周期、增殖及对化疗药物的敏感性密切相关。本研究旨在探讨survivin反义寡核苷酸（ASODN）对人乳腺癌细胞系MCF-7的诱导凋亡、特异性周期阻滞、抑制增殖等生物学行为及对长春瑞滨的增敏作用。研究方法用脂质体介导survivin-ASODN转染人乳腺癌细胞系MCF-7,实验采用半定量RT-PCR方法检测MCF-7细胞中survivin基因mRNA的表达,Western blot方法检测survivin基因蛋白的表达,Annexin V/PI双染法通过流式细胞仪检测细胞凋亡率变化,利于PI染色通过流式细胞仪检测细胞周期时相变化,MTT比色法检测细胞的增殖情况及对长春瑞滨的敏感性,电子显微镜下观察反义转染对乳腺癌细胞系MCF-7的凋亡诱导下形态学变化。研究结果（1）survivin-ASODN转染MCF-7细胞48h后,survivin mRNA表达明显下降,且在一定范围内其抑制效应呈浓度依赖趋势。A200组、A400组、A600组分别下调至80.24%、68.52%、49.17%。与对照组相比差异具有统计学意义（P＜0.05）。不同浓度反义转染组之间相比,差异有统计学意义（P＜0.05）。（2）survivin-ASODN转染MCF-7细胞48h后,survivin蛋白表达明显下降,且在一定范围内其抑制效应呈浓度依赖趋势。A200组、A400组、A600组分别下调至75.14%、61.09%、29.73%。与对照组相比差异具有统计学意义（P＜0.05）。不同时间和不同浓度反义转染组之间相比,差异有统计学意义（P＜0.05）。（3）survivin-ASODN转染MCF-7细胞后抑制细胞增殖,并呈时间、浓度依赖性。A200、A400、A600组的48h增殖抑制率分别为35.25%、46.41%和60.36%,A600组24、48和的72h增殖抑制率分别为29.05%、60.36%和69.08%,差异有统计学意义（P＜0.05）。（4）survivin-ASODN转染MCF-7细胞后发生特异性周期阻滞,A600组细胞48h主要阻滞于G2/M期,该期细胞占（41.63±2.11）%,正常对照组、脂质体转染组、正义转染组G2/M期的细胞比例分别为（20.86±0.72）%、（23.15±1.07）和（24.17±0.96）%,差异有统计学意义（P＜0.01）。（5）A600组细胞凋亡率较高,凋亡率达（18.39±1.06）%,正常对照组、脂质体转染组、正义转染组凋亡率分别为（7.05±0.56）%、（6.09±0.61）%和（6.81±0.74）%,差异有统计学意义（P＜0.05）。（6）survivin-ASODN增加MCF-7细胞对长春瑞滨的敏感性,ASODN组细胞存活率随着长春瑞滨浓度的增高而下降,且下降程度与ASODN浓度呈正相关关系,A200、k400、A600组的IC50值分别为（5.1±0.52）μg/mL,（4.6±0.57）μg/mL,（3.7±0.42）μg/mL;S600组、Lip组和正常组分别为（6.6±0.74）μg/mL,（6.8±0.81）μg/mL和（7.1±0.68）μg/mL,相比ASODN组的IC50值明显下降,方差分析差异具有统计学意义（P＜0.05）。（7）透射电子显微镜下观察A600组细胞大部分呈凋亡晚期变化,细胞核固缩,细胞膜微绒毛消失,膜出芽形成小泡,胞质浓缩,可见凋亡小体。对照组无上述表现。结论survivin基因反义寡核酸转染MCF-7细胞后,有效下调MCF-7的survivin mRNA及蛋白表达水平,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,呈晚期凋亡形态学改变,并增强MCF-7细胞对化疗药物长春瑞滨的药物敏感性。